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阿尔兹海默症(Alzheimer’s disease,AD)是一种神经退行性疾病,因患者多数为老年人,故又称为老年痴呆症。AD患者会出现认知、记忆及定向能力障碍。AD的病理学特征是脑内β淀粉样蛋白(Aβ)聚集形成的老年斑、过度磷酸化Tau蛋白组成的神经原纤维缠结以及神经元受损。全世界AD患病人数在逐年增长,但目前仍无有效的治疗方法。近年来以抑制神经炎症为切入点,寻找有望成为治疗或缓解AD的抗炎药物的研究成为热点。连翘酯苷B(Forsythoside B,FTS·B)是一种非甾体类抗炎药物,广泛存在于紫珠属植物当中,具有抗炎、抗病毒、抗菌、神经保护等药理活性,常用于中药方剂。研究表明,非甾体类抗炎药物可以减少AD小鼠脑内的炎症因子从而缓解AD病理学症状。本研究首先通过APP/PS1双转基因小鼠AD模型考察FTS·B对AD症状的缓解作用;然后通过蛋白质组学方法筛选差异性表达蛋白对FTS·B对AD的作用机制进行探究;最后通过LPS诱导的BV-2细胞神经炎症模型验证其对神经炎症的抑制作用。具体研究内容如下:1.通过APP/PS1双转基因小鼠AD模型考察FTS·B对AD的缓解作用采用具有AD病理学特征的APP/PS1双转基因小鼠进行实验,灌胃给药FTS·B 4周后进行行为学测试,包括水迷宫测试、Y迷宫测试和旷场实验。通过免疫组化、western blot实验考察APP/PS1小鼠脑内Aβ、p-Tau、4-HNE、GFAP及Iba1变化。实验结果表明FTS·B改善APP/PS1小鼠学习记忆及空间认知障碍,降低脑内Aβ、p-Tau、4-HNE、GFAP及Iba1水平,减轻AD的病理学特征,降低脑内脂质过氧化水平,抑制脑内炎症的发展。2.通过蛋白质组学方法对FTS·B对AD的作用机制进行探究通过蛋白质组学方法分析APP/PS1小鼠及给药FTS·B的APP/PS1小鼠之间差异性表达的蛋白质,通过生物信息学分析方法筛选其可能作用通路。实验结果表明FTS·B显著改变APP/PS1小鼠脑内与AD相关23种蛋白质,其中ELKS、WDFY1和JIP3三种蛋白与炎症通路相关。FTS·B通过下调ELKS和JIP3抑制NF-κB及JNK信号通路的激活,上调WDFY1促进TLR3信号通路激活从而减弱APP/PS1小鼠脑内神经炎症的发展。3.通过LPS诱导的BV-2细胞神经炎症模型验证其对神经炎症的抑制作用在体外为了验证FTS·B是否通过抑制神经炎症反应从而发挥神经保护作用,考察了FTS·B对LPS诱导的BV-2细胞炎症因子表达的影响以及BV-2细胞的次级代谢产物对HT22细胞的生存率及凋亡影响。实验结果表明FTS·B下调了BV-2细胞由LPS诱导引起的炎症因子IL-1β,IL-6,i NOs,NO和TNF-α的表达,提高了HT22细胞的存活率,降低其凋亡,显示出其神经保护作用。综上所述,连翘酯苷B通过调节炎症相关通路抑制炎症反应,从而达到改善小鼠学习记忆、认知功能障碍以及改善小鼠AD病理学特征,为非甾体类抗炎药用于AD治疗提供实验基础和理论依据。