本文研究目的：比较树突细胞与肺癌细胞融合，肺癌细胞冻融抗原负载DC及肺癌细胞总RNA转染DC三种肺癌DC疫苗诱导抗原特异性CTL的能力，以寻找更有效的抗原制备方法。 研究方法：采集肺癌患者外周白细胞富集血，分离出单个核细胞，用RPMI1640完全培养基悬浮置入25cm2贴壁培养2h，洗去悬浮淋巴细胞，将贴壁单个核细胞以GM-CSF和IL-4诱导培养5天收获细胞，采用树突细胞与肺癌细胞融合，肺癌细胞冻融抗原负载DC及肺癌细胞总RNA转染DC三种负载方式，继续培养2周，光镜和扫描电镜观察细胞，流式细胞仪检测DC表面标志，以此来鉴定培养的DC。用尼龙毛柱法分离外周血T细胞，于不同方式负载抗原的DC共同培养后诱导产生特异性的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)，流式细胞仪分析刺激前后淋巴细胞成分变化，用乳酸脱氢酶(LDH)方法体外测定CTL杀伤肿瘤细胞的效率，比较树突细胞与肺癌细胞融合负载DC，肺癌细胞冻融抗原负载DC及肺癌细胞总RNA转染DC所诱导出的CTL杀伤肿瘤的差异。 研究结果：光镜下观察到DC在培养过程中，悬浮细胞逐渐增多，细胞体积增大，负载抗原的DC和不负载抗原的DC培养到两周均具有典型的DC细胞形态，扫描电镜可见细胞体积增大，表面突起众多，细胞整体呈现树突状外观。树突细胞与肺癌细胞融合，肺癌细胞冻融抗原及肺癌细胞总RNA负载DC后均能够诱导产生特异性的CTL，并能够对靶细胞产生特异性杀伤作用，转染组DC刺激的CTL和融合组均比冻融组杀伤肿瘤细胞的效应强，但转染组DC刺激的CTL和融合组杀伤肿瘤细胞的效应无差别。转染RNA所使用的肿瘤细胞和用于冻融及融合的肿瘤细胞相比，转染所需的细胞少，这在肿瘤细胞不易获的患者中更有利用前景。 研究结论：树突细胞与肺癌细胞融合，肺癌细胞冻融抗原及肺癌细胞总RNA负载DC后均可作为抗原制备DC肿瘤疫苗诱导特异性杀伤作用，而以肺癌细胞总RNA为佳。