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目的焦虑症和焦虑症状在老年人群中患病率较高,是一组常见的心理障碍。目前临床上治疗焦虑症的药物以苯二氮?类(BDZ)、选择性5-HT重摄取抑制剂(SSRIs)两大类为代表。BDZ起效快,但长期使用可影响学习记忆能力;SSRIs起效慢,治疗初期甚至有致焦虑作用,因而临床应用受限。开发新型抗老年焦虑的药物迫在眉睫。课题组前期研究表明三七叶苷(Panax notoginseng saponin from leaves,PNSL)具有抗老年焦虑作用,本论文旨在研究与BDZ、SSRI相比,PNSL抗老年焦虑的作用特点和药理学优势,并探讨其抗老年焦虑的作用机制,为进一步开发利用奠定基础。方法PNSL短期(3天)或长期给药(21天)对老龄小鼠焦虑模型的作用:拟选用12月龄的昆明种雄性小鼠,随机分为溶媒组、氟西汀组、地西泮组、PNSL低剂量组(PNSL-L)和高剂量组(PNSL-H)。短期给药组给药3天,长期给药组给药21天,然后进行行为学和生化指标检测:1 PNSL的抗老年焦虑作用:用高架十字迷宫和明暗箱检测老龄小鼠的焦虑行为,用水迷宫检测老龄小鼠的空间学习记忆能力。2 PNSL抗老年焦虑的作用机制:用Elisa法检测老龄小鼠海马、皮层内γ-氨基丁酸(gamma aminobutyric acid,GABA)水平,用Western-blot法检测老龄小鼠海马、皮层内脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)、GABAA受体α1、α2、α5亚基的表达。结果1 PNSL的抗老年焦虑症的作用1.1高架十字迷宫实验短期给药实验中,与溶媒组相比,氟西汀组、地西泮组、PNSL-L组和PNSL-H组的开臂时间百分比(OT%)及开臂次数百分比(OE%)均无差异(P>0.05)。长期给药实验中,与溶媒组相比,地西泮组和PNSL-H组小鼠的OT%有增加的趋势,但无统计学意义。地西泮组小鼠的OE%增加,差异有显著统计学意义(P<0.05);氟西汀组、PNSL-L组和PNSL-H组OE%增加,差异有非常显著统计学意义(P<0.001)。1.2明暗箱实验短期给药实验中,与溶媒组相比,PNSL-H组的首次由明区进入暗区的潜伏期延长,差异有显著统计学意义(P<0.05),明区停留时间百分比增加,差异有显著统计学意义(P<0.05);而地西泮组、氟西汀组和PNSL-L组首次由明区进入暗区的潜伏期和明区停留时间百分比均无差异(P>0.05)。长期给药实验中,与溶媒组相比,PNSL-L组首次由明区进入暗区的潜伏期延长,在明区停留时间百分比增加,差异有显著统计学意义(P<0.05);地西泮组在明区停留时间百分比增加,差异有显著统计学意义(P<0.05);氟西汀组和PNSL-H组首次由明区进入暗区的潜伏期和明区停留时间百分比均无差异(P>0.05)。1.3水迷宫实验短期给药实验中,与溶媒组相比,地西泮组的搜索时间和搜索距离均延长,差异有显著统计学意义(P<0.05)。与地西泮组相比,PNSL-L组的搜索时间和搜索距离均缩短,差异有显著统计学意义(P<0.05)。与溶媒组相比,地西泮组、氟西汀组、PNSL-L组和PNSL-H组平台所在象限搜索时间百分比和距离百分比均无差异(P>0.05)。长期给药实验中,与溶媒组相比,地西泮组的搜索时间延长,平台所在象限搜索时间百分比和距离百分比降低,差异有显著统计学意义(P<0.05)。与地西泮组相比,PNSL-L组的搜索时间和搜索距离均缩短,平台所在象限搜索时间百分比和距离百分比均增加,差异有显著统计学意义(P<0.05)。2 PNSL抗老年焦虑症的作用机制2.1 PNSL对老年焦虑小鼠海马、皮层GABA水平的影响短期给药实验中,与溶媒组比较,地西泮组、氟西汀组、PNSL-L组和PNSL-H组海马内GABA水平无差异(P>0.05)。PNSL-H组皮层内GABA水平升高,差异有显著统计学意义(P<0.05)。长期给药实验中,与溶媒组相比,氟西汀组、地西泮组、PNSL-L组和PNSL-H组海马和皮层内GABA水平无差异(P>0.05)。2.2 PNSL对老年焦虑小鼠海马、皮层GABAA-R蛋白表达的影响短期给药实验中,与溶媒组比较,氟西汀组、地西泮组、PNSL-L组和PNSL-H组的海马和皮层内GABAA-R蛋白表达均无差异(P>0.05)。长期给药实验中,与溶媒组相比,地西泮组的海马内GABAA-Rα1、α2亚基蛋白表达均增加,差异有非常显著统计学意义(P<0.01),而GABAA-Rα5亚基蛋白表达降低,差异有显著统计学意义(P<0.05)。与地西泮组相比,PNSL-L组海马内GABAA-Rα5亚基蛋白表达升高,差异有显著统计学意义(P<0.05)。与溶媒组相比,地西泮组的皮层内GABAA-Rα1蛋白表达增加,差异有显著统计学意义(P<0.05),GABAA-Rα2亚基蛋白表达增加,差异有非常显著统计学意义(P<0.001);氟西汀组、PNSL-L组和PNSL-H组皮层内GABAA-R蛋白表达均无差异(P>0.05)。2.3 PNSL对老年焦虑小鼠海马、皮层BDNF表达的影响短期给药实验中,与溶媒组相比,氟西汀组和PNSL-L组均能提高老龄小鼠海马内BDNF蛋白表达,差异有非常显著统计学意义(P<0.01);地西泮组和PNSL-H组均能提高老龄小鼠海马内BDNF蛋白表达,差异有非常显著统计学意义(P<0.001)。与溶媒组相比,PNSL-H组皮层内BDNF蛋白表达有升高的趋势。长期给药实验中,与溶媒组相比,地西泮组的海马内BDNF蛋白表达增加,差异有非常显著统计学意义(P<0.01)。与溶媒组相比,PNSL-H组海马和皮层内BDNF蛋白表达有升高的趋势,与地西泮组相比,PNSL-H组海马和皮层内BDNF蛋白表达无差异(P>0.05)。结论1 PNSL具有抗老年焦虑的作用,与BDZ相比,长期用药对空间学习记忆能力无影响;与SSIR相比,起效迅速。提示PNSL治疗老年焦虑症具有起效快,不良反应少的药理学优势。2 PNSL抗老年焦虑作用与提高老龄小鼠海马内BDNF水平和皮层GABA水平及GABAA-Rα2亚基的表达有关。3 PNSL可能是治疗老年焦虑症的候选药物。