樟属植物提取工艺对鸡排泄物中尿酸酶及其产生菌的影响

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随着人们环保意识的增强,养禽场面临着巨大的压力,通过各种方法来减少养禽场对环境的危害。目前养禽场最大的污染就是氨气,氨气的挥发对空气和人畜健康造成严重危害。对家禽来讲,排泄物中的主要氮源(尿酸),是氨气排放的主要源头。所以减少尿酸的分解,对于保护人畜健康和环境卫生是至关必要的。 本试验共分为三个部分:樟属植物提取工艺的研究,鸡排泄物体外抑制试验和尿酸酶及其产生菌的抑制试验。 试验1包括两个子试验,首先采用浸提和蒸馏两种工艺对樟属植物的有效成分进行提取。浸提采用混合位级正交试验设计L16(44×23),来研究五种因素(温度、时间、体积分数、固液比和来源)对提取效果的影响。通过对CA含量的测定和体外试验结果表明浸提效果优于蒸馏,皮的提取率高于枝叶,皮和枝叶在50℃的提取效果最好。然后将提取得到的CE添加到鸡排泄物中,通过测定脲酶活性和尿酸含量来筛选一种最佳工艺。从结果可以看出,脲酶活性抑制率结果和CA含量结果一致,最终筛选出枝叶50℃,时间6h,乙醇的体积百分数为80%,固液料比为20ml/g组作为最佳工艺参数。 试验2,将上述最佳工艺提取得到的CE按照不同的梯度添加到鸡排泄物中,来测定CE对排泄物中尿酸含量、尿素氮水平,脲酶活性及氨态氮的影响。试验分六个组:对照(空白组)、试验Ⅰ(0.00625%)、试验Ⅱ(0.0125%)、试验Ⅲ(0.025%)、试验Ⅳ(0.050%)、试验Ⅴ(0.10%)组,每组三个重复。试验结果表明试验Ⅳ组(0.050%)具有最佳的抑制脲酶活性,保持尿酸和尿素氮能力。从数据分析结果可以看出,CE可以抑制排泄物中的脲酶活性,减慢尿酸的降解但是对氨态氮的影响比较小。 试验3也分为两部分,第一部分是尿酸酶的抑制试验,通过体外向纯品尿酸酶添加不同水平的抑制剂0,0.0005%,0.001%,0.002%,0.004%,0.008%测定尿酸含量的变浙江大学硕士学位论文化来反映尿酸酶活性,结果表明随着CE中CA浓度的增加,对尿酸酶的抑制效果增强,0.008%组对尿酸酶的抑制效果达到90%以上。第二部分是尿酸酶产生菌(产阮假丝酵母和膜酸毕赤酵母)的抑制试验,采用平板法,通过配置不同浓度梯度(0.0003%,0.0005%,0.0007%,0.0009%,0.001 10/0)的含药平板和无药平板作对照,结果表明CE抑制了尿酸酶产生菌的生长,存在一个剂量依赖关系。 综上所述,本研究得出以50℃,时间6h,乙醇的体积百分数为80%,固液料比为ZOnll/g组提取得到的CE效果最好,并且该提取物以0.005%的浓度在鸡排泄物中添加可以显著的抑制尿酸分解产生氨气。证实了,CE对尿酸氧化酶及其产生菌具有抑制作用的假设。并说明通过体外添加该提取物对于减少养禽场的氨气排放,保护人畜健康,是可行的。
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