恶性肿瘤严重威胁着人类生命安全以及身心健康,而早期诊断是治愈肿瘤的关键。肿瘤标志物的出现则为肿瘤的早期诊断带来了希望。癌胚抗原(Carcinoembryonic antigen,CEA)是存在于结肠癌及胚胎结肠粘膜上皮细胞的一种糖蛋白,是一种最常见的肿瘤标记物,被认为是多种消化道肿瘤的重要诊断及监测指标。如今临床检测CEA的方法是采用酶联免疫吸附反应(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA),但是该方法操作耗时长(竞争ELISA需要～3小时,夹心法ELISA需要～4.5小时),灵敏度也不算高(检测浓度为pM),结果不直观,是相对定量检测(需要标准品做标准曲线来计算出待测样品的含量)。本课题欲开发一种直观灵敏的检测方法。课题开始之初是想利用噬菌体展示技术筛选出与CEA抗原高亲和的多肽,再利用该CEA高亲和肽修饰金纳米粒子,构建一种CEA高亲和肽金纳米探针。此探针结合硅抗体芯片(硅片上修饰有CEA的抗体),可夹心捕获CEA,然后送到扫描电子显微镜(Scanning Electron Microscope,SEM)拍照金探针,利用软件计数金探针。在一定的浓度条件下,金探针的个数与捕获的CEA分子呈现比例关系,因此可根据金探针的数量来获得捕获的CEA抗原分子的数量。但在实际实验时,以CEA抗原吸附于固相平板,多次利用M13噬菌体环七肽库以及12肽库筛选,结果始终未能得到一种或几种序列一致性高的多肽。我们由此推断:噬菌体的固相平板筛选法用于筛选高亲和目标分子的多肽,筛选成功率很低。在上述噬菌体筛选CEA亲和肽实验无理想结果的情况下,我们改用CEA单抗修饰硅片得到CEA抗体芯片,再利用CEA多抗修饰纳米金得到金探针,以此构建一种金探针辅助的抗体芯片。在夹心法捕获CEA分子后,利用扫描电子显微镜(SEM)直接观察纳米金探针,并用计数软件来计数,由此来计数捕获到的CEA分子的数目。结果显示:我们的金探针辅助的抗体芯片SEM扫描计数法,比酶联免疫吸附法方法灵敏度高了近1000倍,检测限达到4 fM。可以实现绝对定量检测CEA分子。因此,我们的金探针辅助抗体芯片,结合自动化SEM分析软件开发,未来有望成为临床绝对定量检测抗原或抗体分子的分析平台。