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2,3-二酮二氢吲哚,又名靛红(ISA),是海洋动物生存所需的内源性活性因子。它是人体的内源性物质,在药用植物青黛中也含有ISA。由于ISA的化学结构较明确,大量的文献证明ISA具有多种生物活性且毒性低。近年来报道ISA具有抗帕金森病、抗癌、抗抑郁和抗惊厥等多种生物活性。然而其在动植物中含量低,为进一步寻找具备高疗效且神经毒副作用小的ISA类抗惊厥药和抗抑郁药,选用化学合成的方法具有特殊意义。研究内容:苯胺作为起始原料,通过Sandmeyer reaction和Schiff base reaction得到了两个系列3-苯亚氨基吲哚衍生物,即2-氧代-3-苯亚氨基吲哚啉-1-N-苯基乙酰胺衍生物(7a-p)和3-苯亚氨基-吲哚啉-2-酮衍生物(8a-q),反应过程中用薄层色谱技术跟踪监测反应,重结晶及硅胶柱层析方法纯化目标化合物,使用熔点仪测试其熔点,采用红外光谱技术,核磁共振氢谱、核磁共振碳谱及气质联用色谱等技术确定目标化合物的结构。利用经典抗抑郁模型小鼠强迫游泳实验(FST),对第一系列及第二系列3-苯亚氨基吲哚衍生物的抗抑郁活性进行研究。利用最大电休克惊厥发作模型和戊四唑小惊厥模型实验,评价3-苯亚氨基吲哚衍生物的抗惊厥活性。采用旋转棒法测试ISA衍生物的神经毒性。利用利血平拮抗模型,研究抗抑郁活性最好的目标化合物对利血平诱发的小鼠抑郁发作的作用机制。研究结果：(一)对16个2-氧代3-苯亚氨基吲哚-1-N-苯基乙酰胺衍生物(7a-p)进行活性评价:1、最大电休克惊厥模型实验结果显示:有10个化合物(7a,7c,7e,7f,7g,7h,7j,7k,7m,7n)在给药剂量为300mg/kg时,具有抵抗最大电休克活性,而先导化合物ISA仅在给药剂量大于300 mg/kg时,才呈现出抗最大电惊厥活性。而其中8个3-苯亚氨基吲哚衍生物(7a,7c,7g,7h,7j,7k,7m,7n)在给药剂量100mg/kg下表现出抗最大电惊厥活性,但化合物(7b,7d,7i,7l,7o,7p)在给药剂量300mg/kg下,没有显示抗惊厥活性。利用旋转棒法测试化合物7a-p的神经毒性结果表明,给药剂量相同的条件下,并未呈现出神经毒性。2、强迫性游泳实验结果显示:所合成的16个2-氧代-3-苯亚氨基吲哚-1-N-苯基乙酰胺衍生物(7a-p),有14个化合物(7a,7b,7c,7d,7e,7f,7g,7h,7i,7j,7k,7l,7m,7o)在100mg/kg给药剂量下与空白组(135.5±25.8s)相比明显的缩短小鼠强迫游泳不动时间,显示出了一定的抗抑郁作用。其中3个化合物,即7g、7k、7o小鼠强迫游泳的不动时间分别为52.8±10.5s、45.2±13.2s、51.5±12.1s与阳性对照组氟西汀相比(37.83±13.1s)几乎相似。另外,化合物7b的小鼠强迫游泳的不动时间为29±11.7s与阳性对照组氟西汀(37.83±13.1s)相比,化合物7b组的小鼠强迫游泳的不动时间小于氟西汀组,说明7b化合物的抗抑郁活性强于剂量为10mg/kg的氟西汀组。(二)对17个2-氧代-3-取代苯亚氨基吲哚啉衍生物(8a-q)进行药理活性评价:1、戊四唑小惊厥模型研究实验结果表明,在给药剂量为100mg/kg下,与模型空白组相比,所有化合物都未表现出神经毒性,其中有14个化合物(8b,8c,8d,8e,8f,8g,8h,8i,8k,8m,8n,8o,8p,8q)能对抗由化学物质戊四唑诱导的惊厥模型,显示抗惊厥活性。化合物8h和8i没有引起强直发作,有显著的抗惊厥活性。2、强迫性游泳实验结果显示:所合成的17个2-氧代-3-苯亚氨基吲哚衍生物(8a-q)与空白对照(140.83±28.5s)相比,13个化合物(8b,8c,8d,8e,8f,8g,8i,8j,8l,8m,8n,8p,8q)显示一定的抗抑郁活性。其中2个化合物8b和8q在剂量为100mg/kg时的小鼠强迫游泳的不动时间分别为43.67±12.5s和40.83±13.6s,与阳性对照组氟西汀活性(37.83±13.1s)几乎相似,说明抗抑郁活性与上市药物氟西汀几乎相似。另有化合物8m、8n不动时间为12.83±6.4s、33.83±9.6s与阳性对照组氟西汀(37.83±13.1s)相比,小鼠强迫游泳的不动时间明显小于氟西汀组。从而得知,化合物8m、8n较剂量为10mg/kg的氟西汀组抗抑郁活性强。(三)对于上述的活性较氟西汀好的化合物7b、8m,采用利血平诱发的小鼠抑郁模型研究,结果发现化合物7b、8m显著改善利血平诱发的小鼠抑郁引起的体温及眼睑等动物行为学变化。通过给药后对小鼠脑内单胺类递质的含量测定结果表明,化合物7b、8m,对致抑郁后给药后小鼠脑内去甲肾上腺素(NE)和5-羟色胺(5-HT)的含量明显提高,使含量基本接近正常水平。由此结果推测化合物7b、4m抗抑郁作用机制与单胺神经递质去甲肾上腺素(NE)和5-羟色胺(5-HT)有关。研究结论:本文在本课题组研究ISA抗抑郁、抗惊厥的基础上,进一步研究ISA衍生物的药理活性。合成了两系列的3-苯亚氨基吲哚衍生物,对其抗惊厥活性和抗抑郁活性进行研究,初步评价了其抗惊厥活性和抗抑郁活性,其中两个化合物7b、8m与阳性对照药氟西汀活性相似。通过动物药效学研究推测抗抑郁活性可能与脑组织中的单胺类递质的含量有关。这也为进一步研究新的高效、毒低抗惊厥药和抗抑郁药提供大量的实验依据。