胃癌是全球最常见的恶性肿瘤之一,其死亡率位居第二。胃癌的发病机制主要包括原癌基因的异常激活以及抑癌基因(TSGs)的失活。除突变等遗传学异常外,表观遗传学调控异常,如组蛋白修饰异常、启动子甲基化等,也能导致肿瘤抑癌基因在转录后失活。在癌症发展过程中,组蛋白去乙酰化能够导致抑癌基因的转录被沉默,这一过程需要组蛋白去乙酰酶(HDACs)的参与,然而有趣的是,许多被沉默的抑癌基因都能够被组蛋白去乙酰酶抑制剂(HDACis)复活。基于这一特点,组蛋白去乙酰酶抑制剂有望成为一种新的肿瘤治疗策略。曲古菌素A (TSA)是组蛋白去乙酰酶的选择性抑制剂,被广泛用于复活抑癌基因的表达。通过比较TSA处理前后基因表达谱的变化我们发现,TSA处理后,PUMA基因表达水平出现了明显的上调。PUMA基因最初作为P53基因诱导凋亡中的一种重要介质而被人们熟知,在P53依赖性与非P53依赖性凋亡中均扮演着非常重要的角色。PUMA也是一种抑癌基因,在药物诱导恶性肿瘤细胞凋亡中起重要作用,然而该基因在胃癌的发生发展中起怎样的作用,迄今为止,我们知之尚少。本研究中,我们旨在了解PUMA基因在胃癌中的表达情况,并进一步探究该基因与胃癌临床病理参数的关联性及其对胃癌生物学行为的影响。材料和方法：1.挑选人类正常胃粘膜上皮细胞株GES-1以及六个胃癌细胞株(AGS、SGC7901、 MKN45、MKN28、BGC823、NCI-N87)。使用实时定量RT-PCR检测不同细胞株中PUMA mRNA的表达水平。2.用Western Blotting方法检测上述七种细胞株中PUMA蛋白表达水平。3.收集24例胃癌组织标本,使用实时定量RT-PCR检测胃癌组织与癌旁正常组织中PUMA mRNA表达水平。4.通过搜索www.oncomine.org数据库,应用Mann-Whitney test、Logrank test、 Cox’s regression model等统计学方法分析PLMA基因与胃癌临床特征的关联性。5.应用携带有PUMA基因的质粒转染MKN28和SGC7901这两种胃癌细胞株,然后通过MTS法及流式细胞术分析PUMA基因表达增加对胃癌细胞增殖能力及凋亡的影响6.应用SiRNA敲减GES-1胃癌细胞中PUMA基因的表达,并通过MTS法检测分析PUMA基因表达减少对胃癌细胞增殖能力的影响。结果：1.与正常胃粘膜上皮细胞株相比,在大多数胃癌细胞株中,PUMA基因无论在mRNA还是在蛋白质水平均表现为明显的表达下调；此外,与癌旁正常组织相比,胃癌组织中PUMA mRNA表达水平也表现为显著下降(P<0.05)。2. PUMA mRNA的表达水平与胃癌临床分期、HP感染、Lau ren分型这三个因素无明显相关性；然而,与生存期超过3年的患者相比,生存期低于3年的患者,其PUMA mRNA表达水平明显下降；虽然应用Logrank test生存曲线分析未发现PUMA mRNA表达水平与总生存具有显著相关性,但应用COX模型进行的多因素生存分析结果提示PUMA mRNA表达水平与总生存成正相关。3.增加PUMA基因表达能抑制胃癌细胞增殖、促进凋亡,反之亦然。结论：无论是在细胞学水平还是组织学水平,PUMA基因表达在胃癌中均表现出显著下调,增加PUMA基因表达能抑制胃癌细胞生长、促进胃癌细胞凋亡,敲减PUMA表达将加速细胞增殖,PUMA表达水平是胃癌非常有价值的预后因子。