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小麦条锈病在小麦生产中引起严重病害,长期以来一直威胁着中国小麦的安全生产。条锈菌是一种活体型寄生菌,但是由于缺乏有效的遗传转化方法,对条锈病的致病基因功能的研究相对较为缓慢,对病害的控制较为困难。然而,病害机制和效应蛋白毒性致病机制在病害的预防和控制中起重要作用。本研究目的是研究条锈菌效应基因Pst03724的功能,为此基因的功能研究供给了理论基础。通过RT-PCR以及PCR的基因克隆获得Pst03724全长cDNA和基因组DNA,通过生物信息学的方法对其序列特征进行了分析。利用瞬时表达、实时定量RT-PCR(qRT-PCR)、亚细胞定位和病毒诱导的基因沉默(HIGS)鉴定该基因功能。序列结果表明,Pst03724全长为长387bp。通过网站预测发现该效应蛋白的信号肽位于其N末端1至36个氨基酸,全长编码129个氨基酸并且不包含跨膜结构和核定位信号。利用PVX介导的农杆菌转化可以显著的抑制由Pst322引起的坏死。利用酵母分泌系统的分析表明Pst03724的信号肽具有分泌功能并且是典型的分泌蛋白。qRT-PCR结果显示,在条锈菌感染过程中,Pst03724表达上调,在18h和24h表达水平较高,并在24h达高峰。利用小麦原生质体定位分析表明,Pst03724仅分布在小麦原生质体的叶绿体中。Pst03724的瞬时沉默可以抑制条锈菌的生长发育。结果表明,小麦条锈菌效应蛋白Pst03724参与了病原菌感染结构的分化。