背景和目的食管癌(Esophageal carcinoma，EC)是世界上最常见的六大恶性肿瘤之一，其发生、发展是多因素、多阶段共同作用的结果。近年来，随着分子生物学的深入发展，对食管癌形成的分子生物学机制有了一定的认识，但其确切的发病机制仍有待进一步探索。本研究应用免疫组织化学技术检测食管鳞癌、癌旁各级不典型增生组织、正常食管上皮组织中整合素(Integrinβ3)、MMP-2和VEGF蛋白的表达情况与食管鳞癌的分化程度、浸润深度和淋巴结转移的关系，以及它们之间的相互关系。目的是探讨Integrinβ3、MMP-2和VEGF在食管鳞癌的发生、发展、浸润、转移过程中的作用及相互关系，并为进一步探讨食管鳞癌发生、发展、浸润、转移机制及寻找抑制食管鳞癌发生、发展的途径提供理论基础。材料与方法1．标本：41例食管鳞癌组织标本收集自郑州大学第一附属医院2002年手术切除标本，所有病例术前均无化疗、放疗及免疫治疗史。病理组织学证实41例食管癌均为鳞状细胞癌，其中Ⅰ级22例，Ⅱ级13例，Ⅲ级6例。浸润深度分两组，浅层组12例，深层组29例。淋巴结转移组22例，手术清扫的食管周围淋巴结中发现癌转移；无淋巴结转移组19例，食管周围淋巴结中未发现癌转移。每例标本均取癌旁组织，包括单纯增生组织17例，轻度不典型增生组织13例，重度不典型增生组织10例，原位癌6例及正常食管上皮19例。2．试剂：兔抗人integrinβ3多克隆抗体购自武汉博士德公司，兔抗人MMP-2多克隆抗体和兔抗人VEGF单克隆抗体为北京中山生物技术公司产品，SP试剂盒为北京中山生物技术公司产品。3．方法：应用免疫组织化学(immunohistochemistry，IHC)SP法检测41例食管鳞癌中Integrinβ3、MMP-2和VEGF蛋白的表达。结果1．Integrinβ3蛋白在食管鳞癌组织中的阳性表达率为82.9％(34／41)，显著高于正常食管上皮21.1％(4／19)(P＜0.05)，Integrinβ3蛋白的阳性表达率随癌组织浸润深度的加深而增加，浅层浸润组和深层浸润组Integrinβ3蛋白的阳性表达率分别为50.0％(6／12)和96.6％(28／29)，差异有统计学意义(P＜0.05)。有淋巴结转移组和无淋巴结转移组Integrinβ3蛋白的表达阳性率为95.5％(21／22)和68.4％(13／19)，差异也有统计学意义(P＜0.05)。在癌旁组织中，从正常食管上皮组织、单纯增生组织、轻度不典型增生组织、重度不典型增生组织到原位癌，Integrinβ3蛋白表达的阳性率呈逐渐增高趋势(其阳性率分别为21.1％、64.7％、69.2％、80.0％、100.0％)，单纯增生组织、轻度不典型增生组织、重度不典型增生组织、原位癌与正常食管上皮相比，差异均有统计学意义(P＜0.05)。Integrinβ3蛋白在各级癌组织中的表达的差异无统计学意义(P＞0.05)。2．MMP-2蛋白在食管鳞癌组织中的阳性表达率为68.3％(28／41)，显著高于正常食管上皮5.3％(1／19)(P＜0.05)，轻度不典型增生组织、重度不典型增生组织和原位癌组织中，MMP-2蛋白的阳性表达率分别为41.7％、80.0％、100.0％，与正常食管上皮比较，差异均有统计学意义(P＜0.05)。浅层浸润组和深层浸润组MMP-2蛋白的阳性表达率分别为41.7％(5／12)和79.3％(23／29)，差异具有统计学意义(P＜0.05)；淋巴结转移组和无淋巴结转移组MMP-2蛋白的阳性率为81.8％(18／22)和52.6％(10／19)，差异也有统计学意义(P＜0.05)；在癌组织中MMP-2蛋白的阳性表达率随分级程度的升高而增高，但无统计学意义(P＞0.05)。3．VEGF蛋白在食管鳞癌组织中的阳性表达率为48.8％(20／41)，显著高于正常食管上皮0.0％(0／19)(P＜0.05)，在正常食管上皮、单纯增生组织、轻度不典型增生组织、重度不典型增生组织到原位癌中的阳性率呈逐渐增高趋势(其阳性率分别为0.0％、23.5％、69.2％、80.0％、83.3％)；轻度不典型增生组织、重度不典型增生组织、原位癌与正常食管上皮相比，差异均有统计学意义(P＜0.05)；浅层浸润组和深层浸润组VEGF蛋白的阳性表达率分别为25.0％(3／12)和58.6％(17／29)，差异具有统计学意义(P＜0.05)：淋巴结转移组和无淋巴结转移组VEGF蛋白的阳性率为63.6％(14／22)和31.6％(6／19)，差异也有统计学意义(P＜0.05)；VEGF蛋白在各级癌组织中的表达呈逐渐增高趋势，差异无统计学意义(P＞0.05)。4．Integrinβ3与MMP-2蛋白在食管鳞癌中的表达呈正相关关系，在34例Integrinβ3蛋白表达阳性的病例中，有27例MMP-2蛋白表达阳性，在7例Integrinβ3蛋白表达阴性的病例中有6例MMP-2蛋白表达阴性。5．Integrinβ3与VEGF蛋白在食管鳞癌中的表达呈正相关关系，在34例Integrinβ3蛋白表达阳性的病例中，有17例VEGF蛋白表达阳性，在7例Integrinβ3蛋白表达阴性的病例中有4例VEGF蛋白表达阴性。6．MMP-2与VEGF蛋白在食管鳞癌中的表达呈正相关关系，在28例MMP-2蛋白表达阳性的病例中，有15例VEGF蛋白表达阳性，在13例MMP-2蛋白表达阴性的病例中有8例VEGF蛋白表达阴性。结论1．Integrinβ3蛋白在食管鳞癌旁各级不典型增生组织中和原位癌的阳性率逐渐增高，提示Integrinβ3蛋白表达可能与食管鳞癌的发生有关：Integrinβ3蛋白在深层浸润组和有淋巴结转移组相对高表达，提示Integrinβ3蛋白表达与食管鳞癌的浸润、转移有关。2．MMP-2蛋白在癌旁各级不典型增生组织中的表达及癌组织中的高表达提示MMP-2蛋白与食管鳞癌的发生及恶性进展有关。3．VEGF蛋白的高表达与食管鳞癌的发生及浸润转移有关。4．Integrinβ3蛋白的阳性表达与MMP-2蛋白和VEGF蛋白表达间呈正相关关系，提示Integrinβ3蛋白的阳性表达上调了MMP-2蛋白和VEGF蛋白的表达。5．联合检测Integrinβ3、MMP-2与VEGF可作为判断食管鳞癌生物学行为的客观指标，对判断食管鳞癌的预后具有重要意义。