实时FQ—PCR在解脲支原体感染实验室诊断中应用的研究

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目的 探讨实时荧光定量聚合酶链反应(real-time FQ-PCR)检测非淋病性尿道炎、宫颈炎等疾病中解脲支原体(Uu)感染的准确性及其在实验室诊断中的应用价值。 方法 采集116疑有Uu感染的临床标本。首先以Uu标准浓度(分别为10~2、10~3、10~4、10~5、10~6拷贝/μL)的自然对数为横纵坐标,循环阈值(CT)为纵坐标,制作标准曲线,直线相关系数接近1;对临床116例标本分别用实时FQ-PCR检测及常规培养法同时检测,并对两种方法的检测结果进行了分析比较;20例标本分别用实时FQ-PCR、培养和超高倍显微镜三种方法检测并对比其检测结果。 结果 应用Uu标准阳性模板制作的定量曲线循环阈值和模板浓度的自然对数具有良好的线性关系,相关系数为0.99。116例临床标本,Uu培养阳性49例,阳性率为42.2%,实时FQ-PCR阳性47例,阳性率为40.5%。Uu培养阳性的49例标本中,实时FQ-PCR法阳性46例,二者诊断符合率为96.6%,经卡方检验两种方法无显著差异(X~2=0.25,P>0.05)。实时FQ-PCR相对于培养法的敏感性为93.9%,特异性为98.5%,两法检测Uu的效率基本相当。三种方法同时检测20例临床标本,超高倍镜检12例阳性,培养法6例阳性,实时FQ-PCR5例阳性。 结论 实时FQ-PCR法不仅能对标本中DNA模板拷贝数准确定量,而且比常规培养法更简便、快捷,是目前临床实验室诊断Uu所致非淋病性尿道炎、宫颈炎等疾病的首选方法。而超高倍显微镜法用于Uu感染的实验室诊断结果不甚可靠。
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