两种微球载体固定化脂肪酶的研究

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脂肪酶在实际应用中的催化能力具有高效性,在反应过程中副反应和副产物比非生物催化剂少,且在较温和的环境下就能进行催化反应,因此,被广泛地应用到了工业化生产中。然而其稳定性差和难回收等缺点限制了其在生产中的应用,为了克服这些缺点,将游离酶通过物理吸附法、包埋法或共价结合法进行固定化研究。本文分为两部分。第一部分,首先以苯乙烯(St)和丙烯酸(AA)为单体,通过乳液聚合法,制备出具有羧基功能基团的P(St-AA)磁性微球,再以所制备的磁性微球为载体,通过共价结合的方法对Candida rugosa lipase进行固定化,考察了不同长度的间隔臂链(乙二胺和PEG400/800/4000)修饰到磁性微球上对克服空间位阻的影响。结果表明,当使用PEG800/4000作为间隔臂链时,可以有效地克服空间位阻。结果还表明,过高的酶载量会产生空间位阻而影响酶的活性。并进一步研究了PEG800在磁性微球上的修饰量对固定化酶活性的影响。第二部分,以乙酸乙烯酯(VAC)、丙烯酰胺(AM)为单体,通过悬浮聚合法制备了P(VAC-AM)高分子微球,并以此高分子微球为载体,通过环氧氯丙烷共价结合Candidarugosa lipase,考察了高分子微球环氧基的修饰条件和脂肪酶的固定化条件。由结果可以看出,转速为600r/min,环氧氯丙烷的用量为3mL,酶的用量为5mg,并且固定化时间为2h时,固定化酶的活性回收率达到最大为48%。
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