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抑郁症是一种常见的情感性精神疾患,主要表现为显著而持久的心境低落,思维行为改变,并伴有躯体症状。其主要特点是慢性、反复发作性。临床上,针刺治疗抑郁症已成为重要的方法之一,显示出了较大的优势。针刺治疗是多靶点、多方面的整体治疗,作用途径较复杂,关于其作用机理的研究多围绕神经-内分泌-免疫网络,尚没有统一的定论。目的本研究关注抑郁状态下大鼠海马神经元及其局部理化环境中的相关蛋白表达,应用抗体蛋白芯片技术,筛选出针刺与药物可能的作用靶点。旨在探讨抑郁状态下,构成海马神经元及其所处微环境中各组织、细胞功能的变化,以及电针与抗抑郁药物干预对这种变化趋势的调节。方法1.分组及模型的建立：采用随机数字表将40只SD大鼠随机分为空白组、模型组、电针组、氟西汀组。除空白组外,其余3组采用慢性不可预知的温和应激结合孤养的方法,造模28天。方法包括：断食,断水,昼夜颠倒,游泳,潮湿垫料,夹尾,束缚。2.干预方法：电针组每日应激前1h针刺“百会”、“印堂”穴,平刺进针0.5-1cm(断续波,30min)。氟西汀组每日应激前1h给予氟西汀灌胃干预,(5ml/kg,10mg/kg)。3.行为学检测：造模前后进行行为学检测(包括体重、旷场、糖水实验),以评价模型建立是否成功,以及比较电针、药物治疗所产生的效应影响的差异性。4.指标检测：采用抗体蛋白芯片技术检测大鼠海马神经元及其所处微环境中相关组织、细胞的蛋白表达。结果1.对大鼠行为学的影响：造模前各组大鼠行为表现无差异性(P>0.05)。造模结束后,与正常组相比,模型组大鼠体重显著降低(P<0.01)、糖水消耗量明显减少(P<0.01),旷场实验水平穿越格数与站立次数减少(P<0.01)。与模型组相比,电针组和氟西汀组大鼠体重均显著增高(P<0.01),糖水摄入量显著增高(P<0.01),旷场实验水平穿越格数明显增加(P<0.01),竖立次数增加(P<0.01)。电针组大鼠体重显著高于氟西汀组大鼠体重(P<0.05),其余的行为学表现方面无统计学差异(P>0.05)。2.大鼠海马神经元及其所处微环境中相关组织、细胞的蛋白表达：①神经元相关蛋白的表达：模型组中,大鼠海马的RAGE、Activin A蛋白水平较空白组相比较出现上调(fold change=1.356,1.240)。相较于模型组, RAGE的蛋白表达在电针组、氟西汀组呈现下调趋势(fold change=0.617,0.624); Activin A蛋白水平同样呈现下调趋势(fold change=0.701,0.604)。②细胞因子相关蛋白的表达：造模后,有7个细胞因子(按增加的幅度排序：IL-1β、IL-13、IL-4. TNF-α、IFN-γ、IL-2、IL-10)在海马中的表达呈现增强趋势。有5个细胞因子在电针、氟西汀药物干预后表达减弱,分别是IL-1β、IL-13、IL-4、 TNF-α、IL-10.其中,电针干预对IL-13、IL-4、TNF-α的下调作用较弱,不在fold change有效考察范围内。③星形胶质细胞相关蛋白的表达：模型组与空白组比较,大鼠海马CNTF R a、EGFR蛋白表达上调(fold change=1.503,1.373)。电针组、氟西汀组与模型组比较,CNTFR α水平下调(fold change=0.728,0.505), EGFR表达水平下调(fold change=0.614,0.475)。④血管内皮细胞相关蛋白的表达：与空白组相比,模型组大鼠海马E-Selectin、 Resistin蛋白水平上调(fold change=1.235,1.218);电针组、氟西汀组与模型组比较,E-Selectin水平下调(fold change=0.648,0.617); Resistin蛋白水平下调(fold change=0.763,0.648).结论：1.28天的慢性不可预知的温和应激结合孤养的造模方法,使大鼠体重下降、糖水摄入量减少、探究行为旷场实验水平穿越格数和站立次数减少,成功模拟了人类的抑郁症状。电针和药物都可改善大鼠的行为学异常。2.模型大鼠海马内RAGE、Activin A、CNTF Rα、EGFR、E-Selectin、Resistin表达有增强趋势,两种干预方法均有下调这种趋势的可能。提示抑郁状态下模型大鼠海马神经元及其微环境中相关组织、细胞(星形胶质细胞、血管内皮细胞)的功能、状态有可能改变,并且电针和药物治疗均有干预这种改变的趋势。3.抑郁状态下,大鼠海马中促炎性细胞因子IL-1β、TNF-α、IFN-γ、IL-2,及抗炎性细胞因子IL-13、IL-4、IL-10表达具有增强的趋势,电针治疗使IL-1β、 IL-10的增强趋势减弱,氟西汀药物干预可降低IL-1β、TNF-α、IL-13、IL-4、IL-10的表达。提示,电针和阳性药物治疗抑郁症的作用机制上可能存在差异性。4.本研究提示了抑郁大鼠脑内可能存在微环境相关组织、细胞的功能改变,验证了一些较明确的针刺作用靶点(IL-1β),并筛选出针刺可能的作用靶点。但对于所筛选蛋白的可靠性及其作用影响机制,还有待实验和临床的进一步验证和完善。