四君子汤拆方对胃癌SGC-7901、BGC-823细胞株侧群细胞增殖、凋亡的影响

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目的:以胃癌SGC-7901、BGC-823细胞株通过流式细胞仪技术分选出的侧群细胞(side population,SP)为研究对象,在四君子汤拆方作用下对两株细胞的增值、凋亡、周期及凋亡相关蛋白表达进行检测,结合四君子汤全方作用的实验结果,阐明四君子汤作用于侧群细胞的机制,并为后续实验打下基础。方法:1.常规体外培养人胃癌细胞株高分化胃癌细胞株MGC-803、中分化胃癌细胞株SGC-7901及低分化胃癌细胞株BGC-823;2.流式细胞仪分选SGC-7901及BGC-823胃癌细胞的SP,并检测MGC-803细胞株中是否存在SP;3.制备四君子汤各拆方含药物血清;4. CCK-8法检测四君子汤拆方药物血清干预前后SP细胞与非侧群细胞(Non-sidepopulation,NSP)及未分选细胞增殖能力的变化;5.流式细胞仪检测药物血清干预后SP细胞周期及细胞凋亡的变化;6. Western blot检测药物血清干预后SP细胞中凋亡相关蛋白Bax及Bcl-2表达的变化情况。结果:1.对6个样本的MGC-803细胞进行SP的分选,分选比例均为0%;2.在药物血清干预后SP的168h细胞增值倍数均要低于生理盐水对照组,差异明显(p<0.05),且表现为与NSP相比较高的现象(p<0.05,个别组p>0.05),与此同时SP在药物血清干预后的增值抑制率低于NSP,差异较明显(p<0.05);3.随着药物血清作用时间的延长,SP细胞的凋亡率逐渐升高(p<0.05),且大体表现出与NSP相比凋亡率较低的现象(p<0.05,个别组p>0.05);4.随着药物血清干预时间的延长,SP与对照组相比G1期逐步升高,G2期及S期逐步降低,药物血清干预后SP的G1期低于NSP,G2期及S期高于NSP,以上比较差异较明显(p<0.05,个别组p>0.05);5.随着药物血清作用时间延长,SP的Bax蛋白的表达与对照组相比逐渐升高,且总体呈现与NSP相比较低的现象(p<0.05,个别组p>0.05),Bcl-2蛋白的表达与对照组相比逐渐降低,且总体呈现与NSP相比较高的现象(p<0.05,个别组p>0.05)。结论:1.四君子汤各拆方药物血清可以抑制胃癌SP细胞增殖,抑制增值机制为细胞周期的改变;2.四君子汤各拆方药物血清可以促进胃癌SP细胞凋亡,促凋亡机制为促凋亡蛋白Bax的表达上调和抑凋亡蛋白Bcl-2的表达下调。
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