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背景和目的食管癌是最常见的消化道肿瘤之一,全球年新发病约48.2万例,年死亡约40.7万例,中国食管癌的粗发病和粗死亡率均居世界第1位,食管癌在我国恶性肿瘤中发病率居第4位、死亡率居第5位。我国食管癌以鳞癌为主,食管腺癌较少。食管癌的治疗与分期有关,分期处于早期或部分中期食管癌患者可以选择手术或放化疗结合的治疗方案,而晚期患者只能选择放化疗。化疗是食管癌治疗的主要手段之一,但最终治疗效果却不够理想。索拉非尼是能够有效抑制丝裂原活化的细胞外信号调节激酶的激酶(MEK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路的小分子多激酶抑制剂。目前,索拉非尼已被用于晚期肾细胞癌及晚期肝细胞癌患者。大量Ⅰ、Ⅱ期临床试验发现索拉非尼在肺癌、乳腺癌、恶性黑色素瘤等恶性肿瘤有治疗效应。关于索拉非尼对食管癌作用尚未报道,本研究旨在初步探讨索拉非尼对人食管鳞癌EC9706细胞株的生长抑制作用及其机制。材料和方法1.细胞划痕实验对照组不加药,实验组以索拉非尼终浓度3μmol/L、6μmol/L加药分组,药物作用24h后,通过显微镜观察、取样、拍照并测量细胞向划痕区域迁移的相对距离。2.Hoechst/PI凋亡检测实验组按索拉非尼终浓度3μmol/L、6μmol/L加药分组,对照组不加药。细胞培养48 h后,正置荧光显微镜观察细胞状态,取样、拍照。3.q RT-PCR检测5种基因m RNA的表达水平实验组按索拉非尼终浓度6μmol/L加药,对照组不加药。细胞培养48h后,收集细胞,q RT-PCR检测索拉非尼作用后MMP2、MMP9、TIMP1、AKT和Bcl-2 m RNA的表达。4.Western blot检测EC9706细胞5种蛋白的表达实验组按6μmol/L加药,对照组不加药。细胞培养48 h后,Western blot检测索拉非尼作用后AKT、p-AKT、Bcl-2、MMP2和TIMP1蛋白表达水平的变化。5.统计学处理统计处理选用SPSS17.0软件。数据资料用x±s表示,两样本用T-test。多组均数比较经方差齐性检验后采用one-way ANOVA,组间比较用LSD-t法。P<0.05认为差别具有统计学意义。每组实验都重复3次以上。结果1.细胞划痕实验中,索拉非尼终浓度3μmol/L组和6μmol/L组细胞培养24h后迁移入划痕区的相对距离较对照组明显增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。2.索拉非尼作用EC9706细胞48h后,同对照组相比,实验组(3μmol/L组和6μmol/L组)红染细胞增多,且随着药物浓度的增加,凋亡细胞明显增加(P<0.05)。3.索拉非尼对EC9706细胞5种基因m RNA表达水平的影响结果显示,与对照组相比,加药组(6μmol/L组)AKT、Bcl2、MMP2、MMP9表达下调,TIMP1表达上调。4.索拉非尼对EC9706细胞5种蛋白水平表达的影响同对照组相比,6μmol/L组索拉非尼能够明显降低AKT、p-AKT、MMP2、Bcl-2蛋白的表达水平,提高TIMP1蛋白表达水平。结论索拉非尼能够上调TIMP1表达水平、下调MMP2、MMP9、AKT、Bcl-2表达水平,可以抑制食管鳞癌EC9706细胞的迁移、促进其凋亡坏死,这些可能是其产生抗肿瘤的机制之一。