【摘 要】
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背景:结直肠癌因其高发病率和高死亡率对人类健康构成巨大威胁。先前的研究表明,隶属于锌金属蛋白酶家族的ADAMTS8在多种肿瘤中受启动子异常甲基化调控而表达下调,并在这些肿瘤中发挥着抑癌因子的作用,但其在结直肠癌中的功能仍然未知。方法:1.采用RT-PCR和qPCR法检测结直肠癌细胞系和原发性结直肠癌肿瘤组织中ADAMTS8的表达水平;2.利用CCK-8增殖实验,克隆形成实验,流式细胞术以及Tran
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背景:结直肠癌因其高发病率和高死亡率对人类健康构成巨大威胁。先前的研究表明,隶属于锌金属蛋白酶家族的ADAMTS8在多种肿瘤中受启动子异常甲基化调控而表达下调,并在这些肿瘤中发挥着抑癌因子的作用,但其在结直肠癌中的功能仍然未知。方法:1.采用RT-PCR和qPCR法检测结直肠癌细胞系和原发性结直肠癌肿瘤组织中ADAMTS8的表达水平;2.利用CCK-8增殖实验,克隆形成实验,流式细胞术以及Transwell实验体外评估结直肠癌细胞系在ADAMTS8影响下的生物学功能变化情况,并通过裸鼠皮下成瘤实验进行体内验证;3.蛋白质免疫印迹技术用于探讨ADAMTS8在结直肠癌中的作用机制。结果:我们发现:1.mRNA水平上的ADAMTS8在结直肠癌细胞系中沉默(6/7),另外在与邻近癌旁组织相比时,其在对应的原发肿瘤组织中表达显著下调。DNA甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷(Aza)可使LoVo细胞系中的ADAMTS8恢复表达;2.ADAMTS8的过表达抑制细胞增殖并诱导凋亡。此外,ADAMTS8抑制细胞迁移和侵袭,并诱导细胞周期阻滞在G2/M期;3.ADAMTS8的过表达导致p-GSK3β,β-catenin,c-myc和BCL-XL下调,cleaved caspase9,Bax,PARP-1上调。结论:ADAMTS8可能作为结直肠癌中的功能性肿瘤抑制基因被开发为有价值的生物标志物。
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