呼吸系统肿瘤是近现代工业革命以来,在全球范围内对人类的身体和生命威胁最大的恶性肿瘤之一。这其中,肺癌是全球致死率最高的癌症,而鼻咽癌在我国的发病率高居所有癌症第八位。如今,对于癌症治疗的医学技术在不断发展,然而总体依然依靠放疗与化疗的方式控制肿瘤患者病情。由于缺乏临床症状和有效筛查程序,大多数肺癌和鼻咽癌被诊断时已为晚期,五年生存率和总治愈率很低,且患者在治疗过程中也十分痛苦。中药天然化合物成分具有来源广、毒副作用小的优势,是良好的抗肿瘤药物来源。检测从中药中提取的成分是否具有抗肿瘤活性,以及分析其抗癌具体药理学机制如何,在癌症治疗中具有重要意义。桑含有多酚、花青素等多种生物活性物质,是一种常用的清热解毒的中药。GuangsangonE(GSE)是从桑叶中提取分离得到的一种桑属植物中特有的Diels-Alder加合物,具有抗氧化等生物活性,但是从未有关于GSE抗肿瘤活性的报道。因此,本课题首先对于GSE抗肿瘤的药理活性进行了药效评价,研究了其对于人源不同癌症细胞株的增殖抑制作用,证明其具有良好的抗肿瘤活性。接着,利用平板克隆实验方法检测出GSE能显著抑制A549细胞和CNE-1细胞克隆团的生长,表明GSE有良好的抑制增殖的能力。通过形态学观察、细胞周期检测、细胞凋亡率的检测、线粒体氧化应激检测、亚细胞结构定位、小干扰RNA转染等实验展开研究,证明GSE抑制了 A549细胞增殖并诱导其凋亡;自噬体标志蛋白LC3B上调,GFP-LC3点聚集增加,表明GSE处理具有细胞自噬诱导作用;GSE通过增强A549细胞的溶酶体活性以及促进了 A549细胞自噬体与溶酶体的融合来增强自噬通量;当自噬被siRNA或抑制剂抑制时,GSE引起的细胞死亡部分减弱,说明GSE引起A549细胞死亡是自噬性的细胞死亡;GSE是通过活性氧ROS积累来激活内质网应激,在ROS清除剂NAC的预处理作用下内质网应激即被阻断。IRE1α抑制剂(4μ8c)或NAC也可阻断自噬细胞死亡,表明GSE是通过ROS介导的内质网应激诱导A549细胞自噬性细胞死亡。此外,GSE可以抑制A549细胞迁移。与此同时,GSE可以抑制CNE-1细胞增殖,并促进caspase依赖性细胞凋亡的发生,且促进自噬标志物LC3B上调,自噬通量也被增加,GRP78的表达上调表明内质网应激的参与,总而言之,GSE通过CNE-1内质网应激发生引起保护性细胞自噬与凋亡对抗。通过本课题的研究,阐明GuangsangonE抗人肺癌细胞A549和人鼻咽癌细胞CNE-1的药理学机制,为GSE的进一步研究奠定了基础,也为发现新的天然抗肿瘤药物提供了有益参考。