水稻光敏感蛋白OsLIR1与LFNR互作的研究

来源 :浙江大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhaodhsnd
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
水稻OsLIR1(LOC_Os01g01340)(Light Regulated protein1)是一个单拷贝核编码蛋白,很早以前OsLIR1基因在mRNA水平受光与昼夜节律调控就已经被报道,但该蛋白的功能一直未知。为研究该基因蛋白水平在光暗下的变化,本研究发展了OsLIR1基因自身启动子融合CDS的Flag标签材料(LIR1p-Flag-LIR1)。  本研究发现,OsLIR1基因的转录水平与蛋白水平都受到光的调控,但两者的表达水平却是相反的。主要表现在:OsLIR1基因的mRNA在光下积累,并在一天光照结束时达到表达最高值,在黑暗中mRNA表达逐渐降低,并在黎明前达到表达最低值;但OsLIR1蛋白水平与mRNA水平正好相反,在光照条件下OsLIR1降解,黑暗中蛋白积累,并且OsLIR1的光降解速率与光强度成正比。在MG132(蛋白酶体抑制剂)和E-64d(溶酶体酶抑制剂)处理条件下检测OsLIR1的光降解,发现LIR1的光降解不是由泛素化-蛋白酶体降解系统或溶酶体降解系统控制降解的。  通过对Flag融合标签材料进行免疫亲和纯化并结合液质联谱分析,我们找到了OsLIR1的互作蛋白铁氧还蛋白-NADP+氧化还原酶(OsLFNR)。通过酵母双杂、Co-IP等实验手段证明OsLIR1确实与LFNR1、LFNR2都互作。亚细胞定位分析表明,OsLIR1与LFNR共定位在叶绿体膜、基质和类囊体膜上。LFNR是光合电子传递过程中非常关键的酶,负责催化光合电子传递的最后一步,将电子从铁氧还蛋白传递给NADP+,生成的还原力NADPH不仅可以用于卡尔文循环中CO2的固定,还可用于清除体内活性氧造成的氧化胁迫。OsLIR1作为受光调控的蛋白,可能通过与LFNR互作对LFNR的功能进行调控。因此,深入研究OsLIR1的生理和生化功能将有助于人类更好的认识光调控植物碳代谢的分子机制。
其他文献
通过筛选灰葡萄孢ATMT突变体库,从中获得了一株致病力增强的突变体BCG183,通过对该突变体的致病力和表型进行分析,发现该突变体致病力增强,在PDA培养基上菌丝生长缓慢,不产生分生
灯光诱杀害虫是一个应用广泛而有效的方法,但灯光诱杀害虫的机理并没有完全阐明,而且如何提高灯光诱杀害虫的效果尚待研究。为了进一步提高灯光的诱杀效果,并从昆虫酶系的角度对
稻属(Oryza)属于禾本科(Poaceae或Gtamineae)稻亚科(Oryzoideae)稻属(Oryza Linnaeus),一年或多年生草本植物。稻属植物在世界上广泛种植,将近一半的人口以稻米为主食。本研究
日本晴水稻(Nipponbare)成熟种子诱导获得的愈伤组织,转至MS液体培养基,培养获得水稻悬浮培养系。用亲合的白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae) JxoI接种水稻悬浮细胞进行
低毒病毒/板栗疫病菌系统,是一个研究病毒宿主相互作用的优良的实验系统。为了更好地了解这种相互作用的分子机制,我们构建了一个处于产生分生孢子时期的野生型无病毒与受病
  底栖动物是滩涂湿地生态系统的重要组成部分,大型底栖动物群落决定着滩涂湿地生态系统的许多重要的生态过程。对滩涂大型底栖动物群落的研究不仅有助于进一步深化群落生态