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目的 胰腺癌是临床上常见的恶性肿瘤之一,一旦确诊,80%已出现转移,死亡率位居第5位,5年生存率不足5%[1],故寻找有效的诊治手段具有重要的意义。研究表明胰腺癌的发生发展伴随许多基因的改变,如:K-ras、P53、P16及DPC4等。最新研究资料表明近一半的胰腺癌存在DPC4(deleted in pancreatic carcinoma)失活,进而使TGF-β信号传导途径中断,失去其对肿瘤细胞的抑制作用,导致细胞过度生长和增殖,因此DPC4的改变可能是胰腺癌发生、发展的重要原因之一[2]。本文通过研究肿瘤抑制基因DPC4对人胰腺癌细胞系JF305生物学行为的影响,探讨DPC4基因抑制胰腺癌生长的机制,为此癌的基因治疗提供理论及实验依据。方法 选择无DPC4表达的人胰腺癌细胞系JF305为实验细胞,采用脂质体介导法将pBK-CMV-DPC4质粒导入JF305中,以转染空质粒pBK-CMV的JF305细胞为阴性对照,未转染的JF305为空白对照,并以含G418 400μg/ml的DMEM进行筛选培养,收集上述三种细胞,提取总RNA,采用RT-PCR法检测上述三种细胞中DPC4的表达;通过测定细胞生长曲线、细胞周期、细胞粘附率和细胞集落形成率检测人胰腺癌细胞系中JF305转染DPC4前后生长、增殖等生物学行为的改变[3] [4]。结果 经G418选择性培养后只有转染质粒pBK-CMV-DPC4和 pBK-CMV 的JF305细胞仍然存活。转染pBK-CMV-DPC4的JF305细胞有DPC4基因表达,而未转染及转染空质粒的细胞无表达。通过细胞记<WP=5>数和MTT法测定发现转染pBK-CMV-DPC4的JF305细胞增殖能力同转染前及转染空质粒的JF305细胞相比明显受到抑制,细胞倍增时间显著延长,G1期细胞数所占比例明显增加,G2/M期细胞数所占比例明显下降,细胞克隆形成率和贴壁率均明显下降,两者差异显著,P<0.001。结论 DPC4转染人胰腺癌细胞系JF305后,JF305可稳定表达DPC4。DPC4可使JF305细胞的G1期细胞明显增多,G2/M期细胞明显减少,而且明显抑制其生长和增殖能力,明显降低其增殖潜力和生存能力。表明DPC4的缺失与胰腺癌的发病关系密切,可能是胰腺癌发生、发展过程中的一个重要的分子事件。DPC4可能成为胰腺癌基因治疗的重要靶位基因。