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目的1.对透明质酸凝胶影响骨折愈合的文献进行Meta分析,探讨透明质酸凝胶对骨折愈合影响的作用;2.通过细胞实验探讨透明质酸凝胶对成骨细胞功能的影响;3.通过动物实验探讨透明质酸凝胶对新西兰兔胫骨骨折愈合的影响。方法:1.透明质酸对骨折愈合过程影响的Meta分析计算机检索Pub Med、The Cochrane Library、EMbase、Web of Science、Chinese database of China National Knowledge Infrastructure数据库。检索时间范围均为从建库到2017年5月29日,查找国内外已发表关于骨折术后应用透明质酸辅助治疗的随机对照研究。由两位研究人员独立筛选文献、提取资料和对纳入研究的偏倚风险进行评价后,采用Rev Man 5.3软件进行Meta分析。2.透明质酸对成骨细胞功能影响的研究建立了小鼠前成骨MC3T3-E1细胞系,利用CCK-8检测不同浓度透明质酸凝胶对MC3T3-E1细胞增殖作用的影响;浓度10%的透明质酸凝胶干预MC3T3-E1细胞后,使用诱导培养基培养,研究透明质酸凝胶对MC3T3-E1细胞矿化作用的影响;提取细胞全蛋白检测Runx2,OCN的蛋白表达情况。3.透明质酸体内成骨作用的研究将48只新西兰兔根据随机数字法随机分为实验组、对照组及假手术组,每组16只,制作右侧胫骨上段骨折模型。实验组从术后第1天开始在骨折断端注射透明质酸凝胶,每只0.2ml,每3天1次;对照组从术后第1天开始注射生理盐水,每3天1次;假手术组术后不做任何处理。分别与术后第2、4、6、8周每组处死4只新西兰兔,骨折部位摄X线片,测定骨折端骨密度,骨折部位取材后进行组织学及免疫学检查。结果:1.透明质酸对骨折愈合过程影响的Meta分析共纳入11个研究,包括763例患者。Meta分析结果显示应用透明质酸凝胶与其他方法处理骨折术后患者在恢复情况(SMD=0.62,95%CI(0.36,0.88),P<0.00001)、关节活动度(SMD=1.45,95%CI(0.61,2.28),P=0.0007)、疼痛评价(SMD=-1.16,95%CI(-2.03,-0.29),P=0.009)、不良反应发生率(OR=0.38,95%CI(0.23,0.65),P=0.0004)等方面差异均有统计学意义,表明透明质酸凝胶有利于骨折患者的愈合及术后康复。2.透明质酸对成骨细胞功能影响的研究透明质酸凝胶干预后MC3T3-E1细胞系外观形形态规则,密度均一,状态稳定;透明质酸凝胶对MC3T3-E1细胞的增殖没有显著作用;浓度10%的HA干预MC3T3-E1细胞后,与对照组相比,实验组钙化结节面积明显较大(P﹤0.05);浓度0.5μg/μL,1μg/μL的透明质酸凝胶干预MC3T3-E1细胞后,Runx 2和OCN的表达进一步上调,1μg/μL时蛋白的表达最多,与对照组较,差异有统计学意义(P﹤0.05)。3.透明质酸体内成骨作用的研究X线结果表明实验组和对照组骨折均愈合。骨形态计量结果表明第2、4、6、8周实验组骨痂面积比对照组大,其中第4、6周实验组骨痂比对照组大,具有统计学意义(P﹤0.05);第2、4、6、8周骨密度实验组均大于对照组,其中第4、6周实验组骨密度比对照组大,具有统计学意义(P﹤0.05)。病理学结果表明术后4周实验组骨痂形成比对照组组更明显。免疫组化结果表明实验组及对照组新生骨组织细胞浆中均可见被染成棕黄色的BMP-2,但实验组深BMP-2的表达比对照组更明显。结论:1.现有临床证据显示透明质酸凝胶有利于骨折患者术后的关节活动度恢复、减轻术后疼痛,且安全性较好,是骨折患者术后一种积极的辅助治疗措施。2.透明质酸凝胶对MC3T3-E1细胞系的形态和增殖作用没有显著影响,但可促进成骨细胞矿化结节的形成;在此过程中成骨因子Runx2、OCN的蛋白表达升高。3.透明质酸凝胶能促进成年新西兰兔骨折骨痂形成,缓解软组织肿胀;在此过程中BMP-2的表达升高。