迟钝爱德华氏菌是目前水产养殖中主要的病原菌,其感染谱甚广,危害巨大。因此,研制能有效预防这种致病菌的疫苗,将会极大的促进水产养殖业的发展。 提取迟钝爱德华氏菌E29L株的OMP和LPS,通过EDC将二者偶联,制备成OMP-LPS偶联疫苗。经聚丙烯酰胺凝胶葡聚糖Sephacryl S-300层析提纯和HPLC鉴定,偶联物3.825 min、4.539 min、5.483 min、6.753 min时间段的峰值出峰时间与OMP和LPS的HPLC图谱主要峰值出峰时间差别明显,初步判断为OMP-LPS偶联物。 OMP-LPS偶联物、OMP、LPS、FKC(福尔马林灭活全菌)以及生理盐水对照组按相同程序分别免疫鳗鲡。通过溶菌酶活性检测、微量凝集反应试验结果显示：鳗鲡经OMP-LPS偶联物、OMP、LPS以及FKC疫苗免疫后,各免疫组间血清中溶菌酶活性没有显著差异,但均远高于生理盐水对照组；OMP-LPS偶联组抗迟钝爱德华氏菌(E. tarda)E29L株的抗体效价较单纯的LPS组、OMP组,FKC组抗体滴度高,且持续时间长；对迟钝爱德华氏菌(E. tarda)E29L株的攻击,OMP-LPS偶联组保护率为84％,高于单纯OMP组的80％,LPS组的44％和FKC组60％。 OMP-LPS偶联物、OMP、LPS、FKC添加佐剂ISA763各组的溶菌酶活性均显著高于不添加佐剂各组,除了FKC+ISA763佐剂组外,其余各组均与不添加佐剂各组差异极显著,且添加佐剂各组保护率都明显高于不添加佐剂各组,说明添加ISA763佐剂能够更好的启动鱼类的特异性和非特异性免疫。 本实验制备迟钝爱德华氏菌OMP-LPS偶联疫苗,结合了OMP和LPS二者优势,获得了一种保护范围宽、免疫原性强的疫苗,实验结果取得了预期的效果。