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目的:甲状腺结节是临床中最常见的一种甲状腺良性病变。其病因目前仍不明了,很可能由多种因素所致,如遗传、雌激素等。根据流行病学结果显示,结节性甲状腺肿患者多为女性,但绝经后的女性与相同年龄阶段的男性甲状腺结节的发病率是类似的,并且随着年龄的增加而增加。另外,研究已初步确定,雌激素对甲状腺癌细胞有促增殖的作用。据此推断,结节性甲状腺肿的发病可能与雌激素水平有关。然而,男性和绝经后的女性,他们的结节形成与雌激素水平有关吗?雄激素是性激素中的另一种甾体激素,也通过其专一的受体介导发挥多种生物学效应,也是雌激素合成的前体。研究表明,雄激素受体在甲状腺癌组织中的阳性率为42.5%,提示雄激素可能在甲状腺结节的发生中起一定作用。这与甲状腺结节的生成有关吗?维生素D是脂溶性维生素,为开环甾体激素。研究证实,维生素D有促甲状腺细胞凋亡的作用,自身免疫性甲状腺疾病与维生素D缺乏有关。维生素D缺乏与甲状腺结节的发生有关吗?为确定上述因素与甲状腺结节的生成是否有关,本实验以男性、绝经前和绝经后女性甲状腺结节患者作为研究对象,测定其外周血以及结节组织与结节旁正常组织中的雌二醇(E2),雌激素受体(ERα,ERβ)、雄激素受体(AR),维生素D受体(VDR)的水平,血清中甲状腺功能指标、雌二醇(E2)、雄激素睾酮(T)及25-羟基维生素D的水平(代表维生素D的水平),探讨这些因素与甲状腺结节形成的关系,为预防和治疗该种疾病提供实验的依据。方法:1取材和分组本实验所用标本取自河北医科大学第二医院腺体外科2014年5月至8月手术切除的甲状腺肿物的组织。将经病理诊断为甲状腺结节的标本,分为结节和结节旁正常组织,分别置于冻存管中,冻于-80℃冰箱中,用于E2、ERα,ERβ,AR、和VDR的测定。同时采集甲状腺肿物患者术前的空腹血清,用于甲状腺功能、睾酮、雌二醇、25-羟基维生素D的测定。实验组、对照组、血清三者均取自同一名患者的标本。2血清中甲状腺功能的测定采用直接化学发光法测定血清中FT3、FT4、TSH浓度。3血清中睾酮及雌二醇的测定采用化学发光法,用美国贝克曼库尔Unicel Dxi 800 Access免疫分析系统仪器测定血清睾酮(T)及雌二醇(E2)含量。4血清中25羟基维生素D的测定采用酶联免疫吸附试验法(ELISA),用Immunodiagnosticsytems生产的25-羟基维生素D测定试剂盒,在美国BIO-TEK ELx800酶标仪上,测定血清中25-羟基维生素D的含量。5甲状腺组织中E2、AR、VDR、ERα、ERβ的测定采用酶联免疫吸附试验法(ELISA),用武汉优尔生生物工程有限公司生产的雌二醇(E2)检测试剂盒、雄激素受体(AR)检测试剂盒、维生素D受体(VDR)检测试剂盒,雌激素受体(ERα、ERβ)检测试剂盒,在美国BIO-TEK的ELx800酶标仪上,测定结节组织及结节旁正常组织中的E2、AR、VDR、ERα、ERβ的含量。6数据分析实验数据采用SPSS 21.0软件进行统计学分析。数据经检验,均不符合正态分布,因此计量资料采用中位数(最小值,最大值)表示,组间差异采用秩和检验分析,P<0.05为差异有统计学意义。相关性使用Spearman秩相关分析,P<0.05为差异有统计学意义。结果:1一般资料42例甲状腺组织结节标本及结节旁正常组织标本,均为成对标本。女性33例,年龄16—71岁,分为绝经前女性组(14例)和绝经后女性组(19例);男性9例,年龄18—83岁,为男性组。2血清中甲状腺功能因患者血清FT3、FT4、TSH浓度均在正常范围,所有患者甲状腺功能正常。3甲状腺结节患者的血清中睾酮、雌二醇以及25-羟基维生素D水平3.1血清中睾酮(T)水平患者血清睾酮水平均在其正常值范围。男性为[2.88(0.04 7.03)ng/ml],绝经前女性睾酮水平[0.31(0.13 0.77)ng/ml]和绝经后女性睾酮水平[0.23(0.04 2.77)ng/ml]。经单样本秩和检验,男性较女性高(Z=-3.051,P=0.002),绝经前较绝经后的高(Z=-2.023,P=0.043)。3.2血清中雌二醇(E2)水平经单样本秩和检验,患者血清雌二醇水平:男性为[25(16 78)pg/ml]在其正常范围(7.63-42.6)pg/ml,低于绝经前女性雌二醇水平[39(20 253)pg/ml,P<0.05],但与绝经后女性雌二醇水平[23(11 37)pg/ml]无统计学差异;绝经前和绝经后水平均在其正常值范围内。3.3血清中25-羟基维生素D(25-OH-Vit D)水平经单样本秩和检验,患者血清25-羟基维生素D水平:男性为[49.01(26.41 81.71)nmol/L],绝经前女性25羟基维生素D含量为[40.88(19.23 77.96)nmol/L];绝经后女性25羟基维生素D水平为[23(19.30 122.51)nmol/L]。三者之间无统计学差异。三组甲状腺结节患者均为维生素D缺乏状态。4甲状腺结节患者甲状腺组织中雌二醇(E2)雌激素受体(ERα,ERβ)水平4.1甲状腺组织中雌二醇(E2)水平男性结节组E2水平[11.17(9.84 15.03)pg/ml]高于结节旁正常组织中E2水平[4.16(3.00 6.02)pg/ml],两者差异有统计学意义(Z=-3.58,P<0.01)。绝经前女性结节组E2水平[12.05(8.98 21.67)pg/ml]高于结节旁正常组织中E2水平[3.96(2.64 5.61)pg/ml],两者差异有统计学意义(Z=-4.5,P<0.001)。绝经后女性结节组E2水平[11.38(5.17 15.75)pg/ml]高于结节旁正常组织中E2水平[4.18(2.62 6.98)pg/ml],两者差异有统计学意义(Z=-5.153,P<0.001)。4.2甲状腺组织中雌激素受体α(ERα)水平男性结节组ERα水平[23.41(20.94 31.23)ng/ml]高于结节旁正常组织中ERα水平[18.51(14.68 20.76)ng/ml],两者差异有统计学意义((Z=3.576,P<0.001)。绝经前女性结节组ERα水平[24.28(18.09 30.51)ng/ml]高于结节旁正常组织中ERα水平[3.96(2.64 5.61)ng/ml],两者差异有统计学意义(Z=-4.044,P<0.001)。绝经后女性结节组ERα水平[24.73(17.48 51.48)ng/ml]高于结节旁正常组织中ERα水平[17.34(12.05 23.32)ng/ml],两者差异有统计学意义(Z=-4.511,P<0.001)。4.3甲状腺组织中雌激素受体β(ERβ)水平男性结节组ERβ水平[13.85(11.61 23.85)ng/ml]高于结节旁正常组织中ERβ水平[9.62(6.94 11.44)ng/ml],两者差异有统计学意义(Z=-3.58,P<0.001)。绝经前女性结节组ERβ水平[13.72(9.31 22.62)pg/ml]高于结节旁正常组织中ERβ水平[9.11(7.20 12.83)ng/ml],两者差异有统计学意义(Z=-4.043,P<0.001)。绝经后女性结节组ERβ水平[15.25(8.85 47.44)pg/ml]高于结节旁正常组织中ERβ水平[8.75(5.33 13.78)pg/ml],两者差异有统计学意义(Z=-4.54,P<0.001)。5甲状腺结节患者甲状腺组织中雄激素受体(AR)水平男性结节组AR水平[4.69(3.07 5.23)ng/ml]高于结节旁正常组织中AR水平[2.71(1.70 3.72)ng/ml],两者差异有统计学意义(Z=-3.046,P=0.002)。绝经前女性结节组AR水平[4.53(3.49 5.25)ng/ml]高于结节旁正常组织中AR水平[2.95(2.28 3.66)ng/ml],两者差异有统计学意义(Z=-4.227,P<0.001)。绝经后女性结节组AR水平[4.75(3.19 5.69)ng/ml]高于结节旁正常组织中AR水平[2.99(2.07 3.95)ng/ml],两者差异有统计学意义(Z=-4.818,P<0.001)。6甲状腺结节患者甲状腺组织中维生素D受体(VDR)水平男性结节组VDR水平[2.58(2.24 3.46)ng/ml]低于结节旁正常组织中VDR水平[4.27(3.64 8.40)ng/ml],两者差异有统计学意义(Z=-3.576,P<0.001)。绝经前女性结节组VDR水平[2.66(1.91 3.00)ng/ml]低于于结节旁正常组织中VDR水平[4.30(3.41 10.41)ng/ml],两者差异有统计学意义(Z=-4.503,P<0.001)。绝经后女性结节组VDR水平[2.61(2.21 3.83)ng/ml]低于结节旁正常组织中VDR水平[4.44(3.37 12.52)ng/ml],两者差异有统计学意义(Z=-5.153,P<0.001)。结论:1甲状腺结节局部的高E2水平以及高ERα和ERβ水平与结节的发生有关。2甲状腺结节局部的高AR水平可能与甲状腺结节的形成有关。3维生素D的缺乏以及甲状腺结节局部的低VDR水平与甲状腺结节的形成有关。