载INH RFP纳米羟基磷灰石-硫酸钙人工骨的制备及体内外释药的实验研究

来源 :宁夏医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:cheng233
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目的研制载异烟肼、利福平抗痨药的纳米羟基磷灰石-硫酸钙骨修复材料,测定并观测其物理化学性质、体内外释药性能及其生物相容性评价。方法采用化学沉淀法制备nHA;采用均匀设计,通过抗压强度测试,筛选最佳组分配比;将制备好的人工骨置于37℃模拟体液中降解,分别于24h、72h及1、2、4、6、8、10、12w九个时相点,用扫描电子显微镜观察人工骨表面降解程度,测量其质量变化,采用电子万能试验机测试每个时相点人工骨的抗压强度;将人工骨置于37℃PBS中释药,采用高效液相色谱法,分别检测其24h、72h及1、2、4、6、8、10、12w九个时相点时的INH、RFP的释放浓度,观察药物的缓释性能;将人工骨植入兔椎体中,分别于术后24h、72h及1、2、4、6、8、10、12w九个时相点,测定人工骨周围椎体及椎旁肌中药物含量,观察体内释药情况;提取人工骨浸提液,采用分光光度计测定并计算溶血率,观察、记录并计算皮内原发刺激指数,将人工骨埋置入肌肉囊,检测并对比分析兔血清中丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、尿素氮、肌酐的变化,以评价其生物相容性。结果制备出分散均匀、形态均一的nHA颗粒,呈长150nm左右,直径20nm左右的针状或棒状,当nHA:CSH:INH:RFP=2:8:0.2:0.2时,人工骨能在保证一定力学性能的同时具备一定的骨诱导作用,其抗压强度为(16.37±0.9600)MPa;随着浸泡时间的延长,扫描电镜观察人工骨表面晶体结构逐渐消失,孔隙减少,最终人工骨表面被无结构的降解物所覆盖;人工骨质量、抗压强度随人工骨降解而逐渐减小;人工骨体外释药过程中,INH 24h、72h及1、2、4、6、8w时相点时的累计释药百分数分别为:44.58%、71.06%、90.23%、95.98%、98.27%、99.72%、100.00%,10w、12w时未检出,RFP 24h、72h及1、2、4、6、8、10、12w九个时相点,累计释药百分数分别为:2.70%、16.82%、39.96%、61.71%、83.88%、96.38%、97.63%、98.00%、98.26%;人工骨体内释药过程中,INH在椎体和椎旁肌中可被检测出浓度均持续到第8周时,且出现突释现象。RFP在椎体直到第12周时仍能被检测出,而椎旁肌第12周时已检测不到药物,RFP总体释放较为平稳,未见明显突释现象;人工骨溶血率为1.53%,原发刺激指数为0,材料植入各时相点以及各时相点与术前比较ALT、AST、BUN、Cr,结果均无显著性差异。结论制备出的载INH RFP纳米羟基磷灰石-硫酸钙人工骨具有较好的力学性能及降解稳定性,具有持续时间较长的有效缓释性能,具有良好的生物相容性,初步达到能提供结构支撑的同时高效杀灭结核杆菌的设计目标。
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