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目的:
通过用组蛋白去乙酰化转移酶抑制剂诱导软骨细胞凋亡,探讨组蛋白乙酰化在骨关节炎发病机制中的作用。
方法:
第一代乳兔软骨细胞随机分为对照组,TSA处理组,分别培养3天。采用MTT法检测细胞存活率,电镜观察TSA致软骨凋亡的作用,硝酸还原酶法(试剂盒)测定TSA作用于软骨细胞培养基上清液中NO含量,免疫印记法(Western Blotting)检测TSA对软骨细胞表达一氧化氮合酶(iNOS)和Fas蛋白的影响。SPSS软件统计分析TSA诱导软骨细胞凋亡与其分泌NO、iNOS和Fas蛋白的相关性。
结果:
1.随TSA浓度增加和作用时间延长,软骨细胞存活率下降,并呈浓度及时间依赖关系。
2.TSA可引起软骨细胞发生凋亡的典型电镜形态改变。
3.TSA可刺激软骨细胞分泌NO。
4.TSA可使凋亡相关蛋白iNOS蛋白和Fas表达增多。
5.TSA诱导软骨细胞的凋亡与软骨细胞分泌NO、iNOS蛋白和Fas蛋白的表达呈正相关。
结论:
组蛋白去乙酰化抑制剂可以诱导软骨细胞凋亡。组蛋白乙酰化与软骨细胞凋亡的NO和Fas途径密切相关。