草原害鼠主要有高原鼠兔Ochotona curzoniae、高原酚鼠Myospalax baileyi、青海田鼠Microtus fuscces、苛岚绒鼠Eothenomys inez,玉龙绒鼠E.proditor、高原白腹鼠Niviventer coninga、喜马拉雅早獭Marmeta himalayana、高山姬鼠Apodemus chevieri、藏鼠兔Ochotana thibetana等10多种。它们喜食牧草,粮食等农作物,是造成我国“三江源区”草原严重退化、黑土滩、草地沙化的重要原因,严重影响和制约着青藏高原区的畜牧业生产和广大农牧民的生存和发展,因此加大害鼠灭治力度是十分必要的。长期以来,人们主要采用化学药物灭鼠,并取得较好成绩,但化学药物存在着污染环境、危害鼠类天敌并对人畜安全构成威胁等缺陷,且在灭治高原害鼠过程中,人们长期使用单一的饵料品种,鼠的拒食问题逐步显现,在一定程度上影响了灭治效果。因此,寻找新型灭治害鼠药物,特别是运用植物性不育灭鼠剂降低害鼠生育力,控制种群数量,从而在农业上对农作物起到减灾增产的实际效果。印楝(Azadirachta indicaA.Juss.)是楝科楝属乔木,原产于印度次大陆,印楝油(Neem oil)是印楝种子机械冷榨得到的植物油,由于其具有较强的杀虫效力,常作为农药防治虫害。现代研究表明,印楝油具有良好的抗生育作用。本研究拟将印楝油做成颗粒制剂应用于草原害鼠防治,通过筛选颗粒剂组方,从而提高药物适口性；在成功建立颗粒剂质量标准并对其做稳定性研究的基础上,对其进行摄食系数研究和药效学研究,从而筛选出最佳作用剂量及探明其作用机理,为生产中应用植物源不育剂控制鼠害提供依据。主要研究结果如下：1.颗粒剂最佳处方筛选及制备工艺研究：以印楝油为主药,在对辅料做制剂处方的配伍前研究后,采用正交试验,以溶化性和摄食系数(Ingestion coefficient)为考察指标,对玉米粉(A)、牛肉香精(B)、花生香精(C)、黏合剂(D)和氧化镁(E)五因素的四个水平进行制剂处方考察,对结果进行综合评分并作方差分析,优选出最佳处方。而后对优选处方进行药效学、溶化性和稳定性验证。结果表明：配伍前研究中,玉米粉为最佳填充剂,增诱剂摄食系数以牛肉香精和花生香精最高,分别为1.66和1.87；正交优选结果为A4B4C3D1E4,即印楝油含量为40%的100g颗粒剂中含印楝油18ml,玉米粉15g,牛肉香精10g,花生香精10g,淀粉：糊精(7：1)5m1,氧化镁10g,叔丁基对苯二酚(TBHQ)0.01g。在优选处方的验证中,颗粒剂药效试验抗生育力为73.7%(P<0.01)；摄食系数为0.58；溶化性验证试验结果表明,水温37.5℃,搅拌5min,3批颗粒全部溶化,符合药典要求；稳定性验证中,薄层板上3批颗粒剂显色点RF相对标准偏差<2%,峰面积相对标准偏差RSD=7.48%,药品较稳定。2.颗粒剂质量标准的研究：以实验室前期研究获得的体外杀精活性单体十八碳酸-四氢呋喃-3,4-二酯作为对照品,通过簿层色谱显色(Thin-layer chromatography colouration)和薄层色谱扫描法(Thin-layer chromatography scanning method)分别做定性鉴别和定量分析试验,并对定量分析测定方法做了方法验证,包括稳定性、精密度、重现性、加样回收率试验。最后对制剂做稳定性评价,包括高温试验(60℃)和高湿试验(25℃,RH92.5%±5%)以及加速试验(10℃±2℃,RH 75%±5%),加速试验包括含量测定、水分测定、溶化性、外观性状检验。结果表明：定性鉴别试验中,薄层板显色斑点清晰,分离度良好,阴性液无干扰；定量分析以TLC扫描法测定印楝油颗粒剂中十八碳酸-四氢呋喃-3,4-二酯的含量,单体平均含量1.95%；方法验证中,方法稳定性RSD=1.34%(n=5),精密度RSD同板=2.57%(n=5)、RSD异板=11.86%(n=5),重现性RSD=15.79%(n=5),平均加样回收率为90.82%、RSD=13.95%(n=5)；制剂稳定性评价中,制剂经过高温试验和高湿试验外观性状无显著变化,质量符合要求,加速试验中,含量测定试验中有效成分含量在第6周开始下降,水分测定试验6个月水分平均增加0.45%(7.68%-8.13%),溶化性符合药典规定,外观性状跟踪研究颗粒剂自第2月颜色开始变深。本试验所确定的质量分析方法稳定可靠,能作为本颗粒剂的质量控制标准；稳定性研究各项指标正常,颗粒剂稳定性较好,有效期暂定为一个月。3.摄食系数研究和药效学研究：将前面已筛选的处方做成印楝油含量分别为30%、40%和50%的3组颗粒剂,并进行摄食系数和药效学研究,从而筛选出最佳剂量组。药效学试验包括抗生育力试验、雄雌生殖组织病理学研究、睾丸脏器指数试验、精子畸形率试验。研究结果表明,3个剂量组的颗粒剂摄食系数对雄鼠组分别为0.67、0.54和0.25；雌鼠组分别为0.55、0.50和0.22。将摄食系数符合要求(=0.3)的30%、40%印楝油颗粒剂进行抗生育药效学研究,结果表明：30%印楝油颗粒剂抗雄性生育力为60%；抗雌性生育力为46.7%；40%印楝油颗粒剂抗雄性生育力为80%；抗雌性生育力66.7%。综合考虑摄食系数和抗生育药效学研究结果,选择40%印楝油颗粒剂进行睾丸脏器指数、致畸试验和病理学研究。40%印楝油颗粒剂睾丸脏器指数1.56±0.54g／100g体重显著,与对照相比下降明显(P<0.05)；40%印楝油颗粒剂致精子畸形率45.22%(P<0.01)；病理学研究中,40%印楝油颗粒剂致雄雌生殖组织严重病变。研究结果表明,40%印楝油两性不育灭鼠颗粒剂有较好的适口性及抗生育效用,有望用于草原鼠害防治。