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第一部分二甲双胍对膀胱癌细胞系增殖、细胞周期、凋亡、迁移和侵袭的影响 目的： 探讨二甲双胍对膀胱肿瘤细胞系增殖、细胞周期、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法： 膀胱肿瘤细胞系T24和J82经不同浓度二甲双胍处理后，分别用CCK8、流式细胞学技术、划痕试验、transwell检测并比较不同浓度下增殖、细胞周期、凋亡、迁移和侵袭的情况。 结果： 二甲双胍能够抑制T24和J82的增殖，其效应具有浓度和时间梯度依赖性。二甲双胍处理后将T24和J82阻滞在细胞周期的G0/G1期。二甲双胍处理24和48小时后，T24和J82中凋亡的细胞比例明显升高。T24经二甲双胍处理后，在第12和24小时其转移和侵袭能力均明显下降。 结论： 在体外实验中，二甲双胍能够有效的抑制肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭，阻滞肿瘤细胞的细胞周期，诱导肿瘤细胞的凋亡。 第二部分口服二甲双胍对大鼠原位膀胱肿瘤发生发展的影响 目的： 在大鼠原位膀胱肿瘤模型上观察口服二甲双胍对膀胱肿瘤发生发展的影响。方法： 24只280g左右的雌性SD大鼠随机平均分成3组，对照组不做处理，诱导组给予MNU膀胱灌注诱导成瘤，处理组同时给予诱导成瘤和口服二甲双胍处理。在第14周时，处死所有大鼠，观察膀胱内肿瘤的生长情况，留取肿瘤组织标本，进一步进行病理分析。 结果： 14周时，对照组没有肿瘤形成，诱导组和治疗组的肿瘤发生率分别为100％（8/8） vs87.5%（7/8），平均肿瘤表面积分别为48.84±17.82 mm2（n=8） vs17.5±10.88 mm2（n=7）（P＜0.05），其中侵润性肿瘤发生率分别为50%（4/8）vs0%（0/8）（P＜0.05）。结论： 在大鼠原位膀胱肿瘤模型上，口服二甲双胍能够显著抑制膀胱肿瘤由非侵润性生长向侵润性生长发展。 第三部分二甲双胍对膀胱肿瘤STAT3信号通路的影响 目的： 检测二甲双胍对膀胱肿瘤细胞STAT3信号通路的影响。 方法： 收集大鼠原位膀胱肿瘤模型对照组膀胱组织、诱导组和处理组的肿瘤组织，用western blot检测磷酸化STAT3、STAT3蛋白水平的差异。二甲双胍处理T24和J82膀胱肿瘤细胞后，用western blot检测磷酸化STAT3、STAT3蛋白水平的差异，用免疫荧光技术检测磷酸化STAT3蛋白变化和胞内定位，用western blot和实时定量PCR检测STAT3的目的基因cyclin D1、Bcl-2、Bcl-XL转录和翻译水平的变化。结果： 在大鼠原位膀胱肿瘤模型中，肿瘤组织的磷酸化STAT3水平明显高于正常尿路上皮组织，二甲双胍处理组的肿瘤组织磷酸化STAT3蛋白水平明显低于未处理的诱导组。在T24和J82细胞中，细胞核内可见较高水平的磷酸化STAT3，二甲双胍处理后磷酸化STAT3蛋白水平明显下凋，其下游目的基因cyclin D1、Bcl-2、Bcl-XL在转录和翻译水平均有不同程度的下调。 结论： 在体内和体外实验中，二甲双胍能够通过抑制膀胱肿瘤细胞STAT3信号通路起到抑制肿瘤发生发展的作用。