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目的: 通过流行病学调查及生化检测,分析血清B细胞活化因子(B cell activating factor,BAFF)水平与牙周临床指标的关系;通过检测人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGFs)是否表达BAFF及其受体,比较慢性牙周炎患者和健康志愿者牙龈组织 BAFF及其受体表达变化,推测 BAFF及其受体是否参与牙周炎症过程;通过分析血清 BAFF与肥胖的关系,以及高糖刺激 HGFs后BAFF、脂肪分化标志基因、炎症趋化因子的表达,初步探索BAFF在牙周炎和肥胖之间的作用。 方法: 1.调查中老年人群身高、体重等一般情况,根据社区牙周指数(community periodontal index,CPI)选取指数牙,检查其菌斑指数(plaque index,PLI)、探诊深度(probing depth,PD)、附着丧失(attachment loss,AL)、出血指数(bleeding index,BI)等牙周临床指标,获得空腹血糖、甘油三酯等辅助检查结果,酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清BAFF水平,分析血清BAFF水平与牙周临床指标的关系。 2.收集健康成人HGFs及外周血,组织块培养法培养HGFs,取第2-3代细胞采用流式细胞术及逆转录多聚酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)检测 BAFF及其受体 B细胞活化因子受体(B cell activating factor receptor,BAFF-R)、B细胞成熟抗原(B cell maturation antigen,BCMA)、跨膜激活剂和钙调素相互作用因子(transmembrane activator andcalcium-modulatingcyclophilin ligand interactor,TACI)的表达,密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),以B细胞的表达为阳性对照;收集正常和慢性牙周炎患者牙龈组织,实时定量 PCR(real-timepolymerasechainreaction,real-time PCR)检测BAFF及其受体表达变化。 3.根据体质指数(body mass index,BMI)将调查人群分为正常、超重、肥胖三组,采用方差分析三组间辅助检查结果、牙周临床指标及血清 BAFF水平与肥胖的关系。 4.采用高糖刺激HGFs1d、3d、5d、7d、9d,real-timePCR检测BAFF、过氧化物酶增殖物活化受体γ2(peroxisome proliferator-activated receptorγ2, PPARγ2)、细胞因子信号转导抑制物3(suppressor of cytokine signaling3, SOCS3)、CC趋化因子配体2(CC chemokine ligand2,CCL2)的表达情况。结果: 1.随着PLI、PD、AL的升高,血清BAFF有升高趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。当BI≥2时,血清BAFF水平明显升高,有统计学差异(P<0.05)。 2.流式细胞检测发现:健康成人HGFs几乎不表达BAFF-R、BCMA、TACI。RT-PCR显示健康成人HGFs中BAFF mRNA水平较弱,BAFF-R、BCMA、TACI的mRNA水平极弱。 3.与健康牙龈组织比较,慢性牙周炎牙龈组织BAFF、TACI mRNA表达水平明显升高(P<0.05)。而BAFFR、BCMA mRNA表达无统计学差异(P>0.05)。 4.正常、超重、肥胖三组间人群的基本情况无差异,血常规指标在正常范围内,空腹血糖、甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇及牙周指标中的PLI、PD、AL在三组间无差异(P>0.05);而 BI在肥胖组中明显升高(P<0.05);血清BAFF水平在肥胖组比正常组升高(P<0.05)。 5.对比低糖对照组,高糖刺激会引起HGFs BAFF mRNA表达升高(P<0.05);PPARγ2有升高趋势;SOCS3在9d时升高明显(P<0.05);CCL2在3、5、7、9d逐渐升高,在5、7、9d升高明显(P<0.05)。 结论: 1. BAFF与牙龈出血指数有相关性,而且BAFF与其受体TACI在炎性牙龈组织中高表达,提示BAFF可能参与牙周炎症的过程。 2. BAFF与肥胖、牙龈炎症存在相关性,提示BAFF在肥胖患者的牙周炎中起着重要的作用。 3.高糖能在一定程度上促进 HGFs脂肪向分化,促进脂肪炎性因子如BAFF、SOCS3和炎性趋化因子CCL2的表达,推测BAFF可能参与了牙周炎与肥胖间关系的调节。