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1.本研究采集PRRS疑似病料，在Marc-145细胞上进行病毒分离，盲传3代，出现细胞病变。根据GenBank中PRRSV美洲株保守N基因序列设计合成了一对引物，利用RT-PCR方法从分离毒株细胞培养物中扩增出大小约374bp片段。病毒在Marc-145细胞上培养36h后做免疫荧光试验(IFA)，出现明显的绿色荧光。证明分离到一株PRRSV毒株。
2.根据GenBank数据库中的PRRSVVR2332毒株GP5的基因序列，设计合成了两对引物，针对GP5蛋白的含有BamHⅠ和EcoRⅠ酶切位点的引物p1/p2和针对GP5蛋白非中和表位缺失含有HindⅢ、EcoRⅠ酶切位点的引物tGP5.1/tGP5.2，RT-PCR扩增GP5基因和tGP5基因的DNA序列，克隆于真核表达载体pcDNA3.1中，经PCR、酶切鉴定及DNA序列测定，表明插入的片段具有正确的阅读框，同时证明分离毒株为美洲株。
3.pcDNA3.1、真核重组质粒pcDNA3.1-GP5和pcDNA3.1-tGP5用Lipofectamine2000转染Marc-145，于37℃5％CO2培养细胞48h，提取总RNA做RT-PCR，结果pcDNA3.1-GP5转染孔在603bp处出现目的条带，pcDNA3.1-tGP5转染孔在495bp处出现目的条带，表明两个重组质粒在细胞中得到转录。同时对转染孔做免疫荧光试验，转染pcDNA3.1-GP5、pcDNA3.1-tGP5质粒的细胞均出现明显荧光，证明重组质粒在Marc-145中得到有效表达。
4.用TIANGEN公司质粒大提试剂盒大提质粒pcDNA3.1-GP5，pcDNA3.1-tGP5和空载体pcDNA3.1，将三种质粒及PBS免疫小鼠4次，每次间隔2周，每次免疫后两周用ELISA、病毒中和试验检测抗PRRSV抗体。结果表明pCDNA3.1-GP5和pCDNA3.1-tGP5均能在小鼠体内有效诱导ELISA抗体和中和抗体，从而为进一步发展有效的疫苗、为PRRS的防制提供了一定的指导意义。