油茶Camellia oleiferα Abel是我国南方的主要经济林木,油茶炭疽病和软腐病是油茶产区发生严重的病害。在防治过程中,化学防治对环境和食品安全的危害性、生物防治的防效慢、农业防治的局限性等问题日益凸显,阻碍了油茶产业的健康发展。菌株R6是在健康的油茶果中分离筛选的对油茶炭疽病和软腐病等多种病害具有较好拮抗作用的枯草芽孢杆菌,本论文主要研究化学杀菌剂与菌株R6可湿性粉剂对油茶炭疽病和软腐病的协同作用,主要研究内容为筛选对拮抗细菌R6无抑制作用的化学杀菌剂,拮抗细菌R6发酵工艺优化,油茶内生拮抗细菌R6可湿性粉剂的研制和菌株R6可湿性粉剂与甲基硫菌灵的协同增效作用研究。主要研究结果如下:(1)筛选对拮抗细菌R6无抑制作用的化学杀菌剂。通过测定杀菌剂对油茶炭疽病菌和软腐病菌的抑制作用及其对菌株R6菌体和芽孢的影响,筛选出了甲基硫菌灵,其对炭疽病菌和软腐病菌具有较好的抑制作用,EC50分别为2.425 mg/L和0.914 mg/L。在供试浓度下,甲基硫菌灵的不同质量浓度对菌株R6菌体和芽孢的存活数无显著性差异。不同质量浓度的甲基硫菌灵与菌株R6发酵液混配使用对炭疽病菌的抑制率提高了 9.99%～36.26%,对软腐病菌的抑制率提高了 6.67%～13.19%。(2)拮抗细菌R6的发酵工艺优化。首先进行了菌株R6发酵培养基的优化,以菌体浓度和抑菌率作为指标进行的单因素筛选试验确定了葡萄糖为最佳碳源,酵母膏为最佳氮源,硫酸镁为最佳无机盐。在此基础上进行了响应面分析,得到的最佳的发酵培养基为葡萄糖5.02g/L、酵母膏15.10g/L、硫酸镁6.82g/L。此时,发酵液的菌体浓度、对炭疽病菌和软腐病菌的抑制率较优化前分别提高了 19.20%、13.65%和12.31%。在优化好的发酵培养基的基础上进行了发酵培养条件的优化,Plackett-Burman试验设计筛选出对菌体浓度影响较大的3个重要因素即初始pH、摇床转速和培养温度,经过响应面分析得到的菌株R6最佳的发酵条件为初始pH8.10、培养温度30.30℃、摇床转速171.50r/min、接种量5%、培养时间24h。在此条件下,发酵液的菌体浓度、对炭疽病菌和软腐病菌的抑制率较优化前分别提高了 9.56%、12.24%和10.50%。结合生产实际的需要,最终得到的发酵工艺为:葡萄糖5.02g/L、酵母膏15.10g/L、硫酸镁6.82g/L、初始pH8.10、培养温度30.30℃C、摇床转速171.00r/mmin、接种量5%、培养时间24h。(3)油茶内生拮抗细菌R6可湿性粉剂的研制。综合考虑菌株R6本身的性质和各剂型的特点,将菌株R6的发酵液研制成了可湿性粉剂。以菌株的生物相容性、润湿性和分散性作为指标,对可湿性粉剂中的载体和助剂进行了筛选。最终得到的菌株R6可湿性粉剂的最佳配方为原药70%,木质素磺酸钠7%、十二烷基苯磺酸钠3%、羧甲基纤维素钠2%、抗坏血酸0.1%、高岭土补足至100%。菌剂在室温25℃贮存120d后对两种病原菌的抑菌率也均在65%以上。(4)油茶内生拮抗细菌R6可湿性粉剂与甲基硫菌灵协同作用研究。在9个复配杀菌剂中,复配杀菌剂F8即R6菌剂与70%甲基硫菌灵的质量比为7:1时,对油茶炭疽病菌的抑制作用为增效作用,SR值为2.055。复配杀菌剂F9即R6菌剂与70%甲基硫菌灵的质量比为9:1时,对油茶软腐病菌的抑制作用为增效作用,SR值为1.567。盆栽试验和林间试验表明,复配杀菌剂F8和F9的500倍液对油茶炭疽病和软腐病的防效均在67%以上,防治效果均优于对照组百菌清。