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纤维素占植物干重的35％—50％，是地球上分布最广、含量最丰富的可再生资源，纤维素酶可将其转化为人类所需的能源、食物和化工原料，对解决当前环境污染、食物短缺和能源危机具有重要意义。关于纤维素酶的生产方法，国内研究较多是单菌株发酵产纤维素酶，混合菌株发酵研究较少。本文选用实验室筛选的三株纤维素酶生产菌，进行了单菌株与双菌株混合摇瓶发酵实验，对六种不同发酵液进行了纤维酶的提取纯化对比研究，并比较了它们各自纤维素酶酶系组分。具体概括如下：1、串珠霉、链霉菌、枝孢菌初始单菌发酵实验中，串珠霉产酶活力最高，链霉菌最低。串珠霉产CMC酶、FPA酶和8G酶活力分别为1.46 IU、1.04 IU、0.38 IU。2、通过单因素和SAS二水平设计及响应面分析，得到了串珠霉发酵产纤维素酶最佳条件。PB设计法筛选出影响其产酶活力的显著因素为稻草添加量、麸皮添加量和pH。BB设计法对这三个显著因素响应分析得最佳发酵条件为：稻草粉6.3％，麸皮2.8％，豆饼粉3％，玉米粉2％，KH2PO40.5％，CACl20.3％，pH4.7，28℃，接种量3 mL，发酵7天。实验结果有良好稳定性，优化后串珠霉产CMC酶、FPA酶、βG酶活分别达2.45 IU、1.37 IU、0.72 IU，是优化前的1.68、1.30、1.89倍。3、混菌发酵产纤维素酶实验得出：a、产纤维素酶酶活最高的是串珠霉与链霉菌混合发酵，CMC酶、FPA酶、βG酶酶活分别为3.75 IU、1.52 IU、2.45 IU；其次是串珠霉与枝孢菌混合发酵，产CMC酶、FPA酶、βG酶酶活分别为4.08 IU、1.53 IU、2.71 IU，枝孢菌与链霉菌发酵产酶最小，产CMC酶、FPA酶、βG酶活分别为1.42 IU、1.28 IU、0.31 IU；b、真菌与真菌混合时之间存在竞争性抑制作用，早期二者必须分开培养；真菌与放线菌混合时彼此互利共生，一起培养比分开培养酶活高。c、混菌株发酵产纤维素酶酶活比单菌株高，并且发酵周期比单菌株短。4、优化得到串珠霉与链霉菌混合发酵产纤维素酶最佳条件为：稻草粉5.8％，麸皮3％，豆饼粉3％，玉米粉2％，KH2PO40.5％，CACl20.3％，起始pH 4.5，链霉菌：串珠霉接种比例3.55 mL∶2 mL，先37℃发酵4天再28℃继续发酵，发酵总时间5.75天。在此条件下，产CMC酶、FPA酶、βG酶酶活分别为4.08 IU、1.53 IU、2.71 IU，是各单菌株发酵酶活的2.79—4.25倍、1.47—2.39倍、5.4—7.13倍。5、纤维素酶酶系分析发现：从6种发酵液提取纤维酶采用的盐析硫酸铵饱和度不同；6种粗制酶液经相同条件层析，它们各自的CMC酶、FPA酶、βG酶酶活吸收峰个数及位置不一样；6种精制纯化后的酶液经SDS-PAGE电泳得到的纤维素酶蛋白条带数及Rf值也各有区别，而且比较分析发现混菌发酵产生的酶蛋白条带较单菌多，纤维素酶酶系较齐全。这说明了不同菌株之间及单菌株与混合菌株之间发酵产纤维素酶酶系是有差别的，由于混合菌株发酵时菌株间存在相互影响，相互协同作用，因此有助于纤维素酶活力的提高。