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目的:1.学会体外培养SD大鼠的骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs),研究并完善骨髓间充质干细胞源性微囊泡(bone marrow mesenchymal stem cells-derived microvesicles,BMSCs-MVs)的分离、提取以及鉴定的方法;2.研究BMSCs-MVs对软骨细胞的调控作用,探讨它在NF-k B途径信号通路中的调控机制;方法:1.于体外培养并适时传代SD大鼠的BMSCs;2.从体外培养的SD大鼠的BMSCs中通过超速离心提取并扩增BMSCs-MVs,进行相应的细胞学和形态学鉴定;3.于体外培养并传代SD大鼠的软骨细胞,并进行相应的细胞学和形态学鉴定,为之后实验提供部分来源;4.分组将BMSCs-MVs与SD大鼠软骨细胞共培养,经适时传代后,提取总RNA,逆转录后进行RT-PCR检测相关因子,利用SPSS 16.0软件进行结果的统计学分析。进而探究BMSCs-MVs对软骨细胞在增殖和凋亡方面的影响,以及BMSCs-MVs作用于软骨细胞信号通路NF-k B转导的机制;结果:本实验结果采用SPSS16.0软件进行处理与分析,结果采用(均数±标准差)来表示,不同实验处理目标基因的相对表达值分别采用独立样本的t检验进行分析,软件处理后的结果(p<0.05),意义为此次实验数据差异有统计学意义。1.各实验组和空白组进行比较,促凋亡的p53基因的表达量减少(p<0.05);实验组内进行比较,BMSCs-MVs+抑制剂EVP4593组与BMSCs-MVs组相比p53基因的表达量减少(p<0.05);BMSCs-MVs+抑制剂EVP4593组与抑制剂EVP4593组相比p53基因的表达量减少(p<0.05);同实验组在不同时间点(4h与24h)相互比较,基因p53表达量无显著差异(p>0.05);2.MVs组与空白组对比,抑制凋亡基因Bcl-2的表达量均显著增加(p<0.05);抑制剂EVP4593组及BMSCs-MVs+抑制剂EVP4593组分别与空白对照组相比,抑制凋亡基因Bcl-2的表达量均显著减少(p<0.05);BMSCs-MVs+抑制剂EVP4593组与MVs组相比Bcl-2基因表达量显著减少(p<0.05);BMSCs-MVs+抑制剂EVP4593组与抑制剂EVP4593组相比Bcl-2基因表达量显著减少,(p<0.05);相同实验组的不同时间点(4h与24h)相互比较Bcl-2基因表达量无显著差异(p>0.05);结论:1.BMSCs-MVs具有减少软骨细胞中促凋亡因子p53表达和增加抑凋亡因子Bcl-2表达的作用;2.BMSCs-MVs对软骨细胞的作用是多种通路实现的,NF-kb通路在此过程中的权重尚不明确。