清胆补肾汤对肝内胆汁淤积孕鼠的实验研究

来源 :湖北中医学院 湖北中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wjmwjm009
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目的:本实验运用以清热利湿、滋阴补肾为立法的清胆补肾汤研究对肝内胆汁淤积孕鼠血清影响、肝脏病理结构变化及肝脏ICAM-1mRNA在不同部位的表达的影响。 方法:动物及分组:成年Wister雌性大鼠60只,清洁级,体重200-250g,适应性饲养3天后,与雄性大鼠2:1合笼,每日观察阴栓脱落,阴栓脱落日定为妊娠第1日,一直饲养到妊娠第12日待用。60只孕鼠随机分为6组(每组10只),空白对照组、模型对照组、清胆补肾方高剂量组、清胆补肾汤中剂量组、清胆补肾汤低剂量组、西药组。造模及给药方法:除空白对照组肌肉注射生理盐水(2.5mg/kg-1·d-1)外,其余各组于妊娠第12日起肌肉注射EE,剂量为2.5mg/kg-1·d-1(EE溶于丙二醇中),连续5天,清胆补肾汤高、中、低剂量组及西药组于妊娠第17日给予100%、50%、25%清胆补肾汤,地塞米松按0.1mg/100g体重皮下注射,每只1次,1日1次。取材及检测方法:分娩第1天眶静脉采全血3ml,室温下自凝20min后,离心沉淀10min,离心速度为3000r/min,操作按试剂盒说明进行。由湖北省中医院检验科完成。断头法处死大鼠,分离肝胆管,灌流,处理肝组织,离心,震荡,加入ICAM-1荧光抗体;取出肝脏组织置于10%甲醛内,固定24h以上,56℃石蜡包埋,HE染色,观察光镜下肝脏组织学改变。统计方法:均t检验。 结果: 1 模型对照组孕鼠血清ALT、AST、ALP、TBIL、TBA均明显高于正常对照组(p<0.01),清胆补肾汤高、中剂量组与空白对照组血清各项指标均无差异(p>0.05),空白对照组与清胆补肾汤低剂量组除DBIL外(p>0.05)各项指标均有显著性差异(p<0.01,p<0.05),模型对照组与清胆补肾汤高、中、低剂量组除TBIL、DBIL外各项指标均有显著性差异(p<0.01),西药组与清胆补肾汤中剂量组除ALT外(p<0.05),清胆补肾汤中剂量组血清AST、ALT值明显低于西药组(p<0.01),其余各项指标均无差异(p>0.05)。 2 空白对照组肝脏无明显形态改变,模型对照组孕鼠肝脏病理结构发现部分毛细血管内有胆栓形成,清胆补肾汤高、中剂量组孕鼠肝脏病理结构肝小叶结构完整,未见胆汁样物质沉积,清胆补肾汤低剂量组及西药组肝脏病理结构见肝窦附近少许肝细胞水肿,未见胆汁样物质沉积。 3 ICAM-1在模型对照组肝细胞、胆管内皮细胞、门静脉内皮细胞上的表达明显高于空白对照组及清胆补肾汤中剂量组(P<0.01);ICAM-1在空白对照组肝细胞、胆管内皮细胞、门静脉内皮细胞上的表达与清胆补肾汤中剂量组及西药组有明显差异(P<0.01);)ICAM-1在西药对照组肝细胞、门静脉内皮细胞上的表达与清胆补肾汤中剂量组有明显差异(P<0.01),在胆管内皮细胞上的表达与清胆补肾汤中剂量组无差异(P>0.05)。 结论:为了探讨清胆补肾汤治疗妊娠期肝内胆汁淤积症的可能作用机制,我们设计了本课题以探讨清胆补肾汤对肝内胆汁淤积孕鼠肝脏血清、病理结构及ICAM-1的表达的影响,以为其临床提供坚实的理论基础。从血清水平、肝脏病理结构及肝脏ICAM-1表达等不同水平论证了清胆补肾汤对肝内胆汁淤积孕鼠具有明显改
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