电针刺激足三里和肾俞穴对兔内毒素性急性肾损伤的影响

来源 :天津医科大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:Cary1986
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目的:内毒素性急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)被认为是预测危重症患者病情发生发展及预后的独立危险因素。研究表明,电针刺(electro-acupuncture,EA)可减轻内毒素引起的脏器损伤程度,但具体机制尚不清楚。本研究拟通过电针刺激足三里和肾俞穴来探讨电针刺对内毒素性AKI肾脏的保护作用及其与肾脏HO-1表达的关系。方法:健康雄性新西兰大白兔60只,2月龄,体重1.5-2.0kg,采用随机数字表法将其随机分为6组(n=10):对照(C)组、血红素氧合酶.1(HO-1)抑制剂锌原卟啉-IX (ZnPP-IX)(Z)组、内毒素性急性肾损伤(AKI)组、电针刺激穴位+AKI(EA)组、电针刺激非穴位+AKI(SEA)组、电针刺激穴位+AKI+ZnPP-IX(EAZ)组。所有动物以20%乌拉坦(1.5g/kg)腹腔注射麻醉后气管切开插管,保持自主呼吸。右侧颈内动脉置管监测动脉压,耳缘静脉给予脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)5mg/kg建立兔内毒素性AKI模型。给予LPS后2h血压下降至基线值的75%及以下为内毒素性AKI模型制备成功的标准。EA组和EAZ组电针刺激双侧足三里和肾俞穴,疏密波,频率15Hz,刺激强度以兔出现轻微肌颤为宜,1次/d,15min/次,连续5天;SEA组刺激足三里和肾俞穴旁开0.5cm处;手术当天常规麻醉后持续给予电针刺激;AKI、EA、SEA、 EAZ组耳缘静脉注射LPS5mg/kg,C和Z组给予等容量生理盐水0.5ml。Z和EAZ组给予LPS后2h腹腔注射ZnPP-IX10μmol/kg,其它4组给予等容量NaHCO31ml。注射LPS后6h经心脏取血,经膀胱取尿液,全自动生化分析仪测定血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)和尿α1微球蛋白(α1-MG)浓度;ELISA法测定血清致炎因子TNF-α和抑炎因子IL-10浓度;放血处死兔取肾脏,采用苏木素伊红(HE)染色法,电镜下观察肾组织病理学改变并评分(HSK); TUNEL法检测肾组织细胞凋亡情况,计算细胞凋亡指数(AI);硫代巴比妥酸法测定肾组织丙二醛(MDA)含量、黄嘌呤氧化酶法测定肾组织超氧化物岐化酶(SOD)活性;Western blot法检测肾组织HO-1蛋白的表达、RT-PCR法检测肾组织HO-1mRNA基因的表达情况。结果:与C组比较,AKI、EA、SEA和EAZ组血清BUN、Cr、TNF-α、IL-10、尿α1-MG浓度、HSK评分、AI、MDA含量均升高,SOD活性降低,HO-1蛋白、HO-1mRNA基因的表达均上调(P<0.05),Z组上述各项指标差异无统计学意义(P>0.05);与AKI组比较,EA组血清BUN、Cr、TNF-α、尿α1-MG浓度、HSK评分、AI、MDA含量均降低,血清IL-10浓度、SOD活性升高,HO.1蛋白、HO-1mRNA基因的表达均上调(P<0.05),SEA和EAZ组上述各项指标差异无统计学意义(P>0.05);与EA组比较,SEA和EAZ组血清BUN、Cr、TNF-α、尿α1-MG浓度、HSK评分、AI、MDA含量均升高,血清IL-10浓度、肾组织SOD活性降低,HO.1蛋白、HO-1mRNA基因的表达均下调(P<0.05);而SEA和EAZ两组间上述各项指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论:电针刺激足三里和肾俞穴可减轻内毒素性AKI兔肾脏损伤程度,其机制可能与其上调肾脏HO-1表达相关。
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