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准确鉴定鱼卵的种类是开展鱼类早期资源研究和评估鱼类资源年际补充量重要的前提。本研究采用DNA条形码技术,选择Cyt b基因作为标记基因,使用合适的通用引物对其PCR扩增,经过测序和序列分析,对长江上游江津江段所采集到的漂流性卵和人工鱼巢上的粘性卵进行种类鉴定,以期为鱼类早期资源种类鉴定建立一种快速、准确的分子鉴定方法。其主要研究结果如下:1.基于DNA条形码鱼类早期资源种类鉴定技术的建立DNA条形码技术鉴定鱼卵种类的关键在于鱼卵DNA的提取、通用引物的筛选以及PCR扩增。本研究比较了3种单枚鱼卵DNA提取方式,3对通用引物的扩增效果和测序结果的准确度。最后选择快速提取鱼卵DNA法作为单枚鱼卵DNA的提取方法,通用引物对1 H15149/L14735作为扩增鱼类Cyt b基因上长度为464bp的DNA片段。再将未经纯化的PCR产物送至测序,将测序所得的序列处理后在NCBI数据库中利用自带的blast软件进行序列比对和物种鉴定。碱基相似度在98%之上的即可认为是同一种鱼。2.2014年长江上游江津段人工鱼巢上的粘性卵种类鉴定2014年4月29日、5月11日选取了长江上游江津段顺江、朱杨和龙华3个样品采集点的人工鱼巢进行粘性卵的采集,两次共随机采集到147个样本,采用上述建立的分子鉴定技术对全部样本进行种类鉴定。结果显示在三个采样点所采鱼卵的种类有鲫(Carassius auratus)和鲤(Cyprinus carpio)2种,顺江的20个样本中,鲫16个,占80.00%;鲤4个,占20.00%。在朱杨采集到86个样本中,鲫有20个,占23.26%;鲤有66个,占76.74%。龙华的42个样本中,鲫有31个,占73.81%;鲤有11个,占26.19%。3.2015年长江上游江津段人工鱼巢上的粘性卵种类鉴定2015年3月26日、4月15日和5月13日选取了长江上游江津段顺江、朱杨、二郎石和石蟆4个样品采集点的人工鱼巢进行粘性卵的采集,共随机采集到1989个样本,采用上述建立的分子鉴定技术对其中的468个样本进行种类鉴定,包括400枚鱼卵和68尾幼鱼。结果表明鱼卵种类有2种,分别是鲤和鲫,幼鱼种类共有11种,分别为鲤、鲫、李氏吻鰕虎鱼(Rhinogobius leavelli),短须颌须鮈(Gnathopogon imberbis),高体鳑鲏(Rhodeus ocellatus),华鳈(Sarcocheilichthys sinensis),大鳍鱊(Acheilognathus macropterus),太湖新银鱼(Neosalanx taihuensis),麦穗鱼(Pseudorasbora parva),食蚊鱼(Gambusia affinis),嘉陵颌须鮈(Gnathopogon herzensteini)。4.2015年长江上游江津段漂流性卵种类鉴定2015年5月20日至6月9日在长江江津油溪段使用圆锥网共随机采集107个漂流性鱼卵,采用上述建立的分子鉴定技术对其进行种类鉴定,鉴定结果表明样本中共有14种,其中鲢(Hypophthalmichthys molitrix)2个,占1.85%;中华金沙鳅(Jinshaia sinensis)2个,占1.85%;吻鮈(Rhinogobio typus)19个,占17.59%;子陵吻鰕虎鱼(Rhinogobius giurinus)1个,占0.93%;宜昌鳅鮀(Gobiobotia filifer)36个,占33.33%;铜鱼(Coreius heterokon)5个,占4.63%;寡鳞飘鱼(Pseudolaubuca engraulis)22个,占20.37%;光唇蛇鮈(Saurogobio gymnocheilus)7个,占6.48%;草鱼(Ctenopharyngodon idellus)4个,占3.70%;银鮈(Squalidus argentatus)5个,占4.63%;中华沙鳅(Botia superciliaris)1个,占0.93%;银飘鱼(Pseudolaubuca sinensis)1个,占0.93%;异鳔鳅鮀(Xenophysogobio boulengeri)1个,占0.93%;犁头鳅(Lepturichthys fimbriata)1个,占0.93%。5.长江上游江津段粘性卵产卵场水生生物和水质环境调查为了解粘性卵产卵场的生态环境,本研究调查了2015年3月至5月人工鱼巢附近的水生生物和水质环境。顺江采样点共鉴定出浮游藻类6门147种,浮游动物3门19种,朱杨采样点共鉴定出浮游藻类6门160种,浮游动物3门19种,二郎石采样点共鉴定出浮游藻类6门116种,浮游动物3门52种,石蟆采样点共鉴定出浮游藻类6门96种,浮游动物3门32种。根据浮游藻类的种类及数量,利用藻类多样性指数法对水质进行评价,Shannon-Wiener生物多样性指数、Margalef丰富度指数和Pielou均匀度指数的变化范围分别是1.663~3.342,5.438~10.135和0.470~0.826,水质评价结果为除了二郎石的水样在5月时受到了中度污染外,其余时间的采样点水质为清洁或者受到轻度污染状态。