雄性动物的繁殖性能与睾丸发育和精子发生密切相关。作为睾丸的重要组成细胞,精原干细胞是雄性动物体内唯一可以将遗传物质传递给子代的成体干细胞,具有极强的自我更新和分化的双重能力。其通过分化为精原细胞,而后进行有丝分裂和减数分裂源源不断地产生精子。MicroRNA（miRNA）作为一种小片段非编码RNA,其经典作用方式是通过与mRNA 3’UTR区靶向结合以调控相关生物学功能。有关研究表明,miRNA广泛参与生精过程,其在雄性繁殖性状发育上的重要性不容忽视,但目前关于miRNA在牛精原干细胞中的功能研究较少。因此,本研究根据前期安格斯牛睾丸组织转录组测序数据,筛选到在不同发育阶段的牛睾丸组织中差异表达的bta-miR-495作为研究对象。对bta-miR-495的表达特征分析后,利用过表达和干扰手段,以及RT-qPCR、流式细胞术、EdU、CCK-8、双荧光素酶报告分析、Western Blot试验等技术系统地探究了bta-miR-495对牛精原干细胞增殖和凋亡的影响及其机制。本研究为了解牛精子发生的分子调控机制及雄性繁殖性状的分子选育提供了理论依据。主要研究结果如下:1、bta-miR-495的筛选及对牛精原干细胞增殖与凋亡的影响通过已有的牛睾丸组织转录组测序数据,筛选得到初生期和性成熟后差异表达的bta-miR-495。表达特征分析结果表明bta-miR-495在初生期牛睾丸中表达量显著高于成年牛,这与测序数据一致。以牛精原干细胞永生化细胞系为模型,通过过表达和抑制bta-miR-495,使用RT-qPCR、流式细胞术、EdU、CCK-8和Western Blot试验,表明bta-miR-495抑制牛精原干细胞增殖且促进其凋亡。2、bta-miR-495的靶基因的预测与验证使用生物信息学软件Targetscan预测bta-miR-495的潜在靶基因,结合查阅文献筛选到三个可能影响牛精原干细胞增殖与凋亡的潜在靶基因（NABP1、CMTM8、RCN2）,并通过RT-qPCR、双荧光素酶报告分析验证RCN2是bta-miR-495的直接靶基因。3、RCN2-ERK调控牛精原干细胞的增殖和凋亡为了揭示bta-miR-495的靶基因RCN2在调控牛精原干细胞的增殖和凋亡中的重要作用,将RCN2的小干扰RNA转染进牛精原干细胞永生化细胞系。并利用RT-qPCR、流式细胞术、EdU、CCK-8和Western Blot实验技术证明特异性敲低RCN2后,导致MAPK通路中增殖和凋亡关键蛋白ERK的磷酸化水平显著下降,且牛精原干细胞的增殖受到抑制,其凋亡受到促进作用。以上试验结果表明,bta-miR-495和RCN2在牛精原干细胞增殖及凋亡过程中扮演重要角色,并且进一步验证了bta-miR-495对RCN2的靶向沉默作用,为进一步了解精子发生过程中复杂的分子调控机制提供了帮助。