【摘 要】
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畜牧业集约化养殖存在家畜缺乏运动以及高能量饲料导致脂肪沉积异常等问题。商品猪内脏脂肪及皮下脂肪过度沉积造成的瘦肉率及肉品质下降,极大地影响畜产品高品质发展,是畜牧业亟待解决的问题。因此寻求安全有效的精准营养调控方式十分必要。龙血素B（Loureirin B,LB）是提取自龙血竭的天然小分子药物,具有消肿止痛、活血化瘀、促进线粒体功能等生物活性,能够促进新陈代谢。因此,本试验利用LB处理高脂饮食诱导
【基金项目】
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国家重点研发计划项目（编号:2018YFD0500400）；
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畜牧业集约化养殖存在家畜缺乏运动以及高能量饲料导致脂肪沉积异常等问题。商品猪内脏脂肪及皮下脂肪过度沉积造成的瘦肉率及肉品质下降,极大地影响畜产品高品质发展,是畜牧业亟待解决的问题。因此寻求安全有效的精准营养调控方式十分必要。龙血素B（Loureirin B,LB）是提取自龙血竭的天然小分子药物,具有消肿止痛、活血化瘀、促进线粒体功能等生物活性,能够促进新陈代谢。因此,本试验利用LB处理高脂饮食诱导的肥胖小鼠,通过活体、离体试验阐述LB调控小鼠脂肪沉积与能量代谢的分子机制。主要结果如下:1.LB对小鼠脂肪沉积的影响。通过每两天10 mg/kg的剂量腹腔注射LB,处理10周后显著缓解高脂饮食诱导的肥胖和代谢功能紊乱:在当前LB药物处理的剂量下对小鼠不产生毒副作用,LB处理组显著减少了脂肪组织重量（P<0.05）,且不是由于减少采食量及肠道脂质吸收造成的。LB处理改善了小鼠机体脂代谢状况,表现为血浆中甘油三酯含量和游离脂肪酸水平均降低（P<0.05）;同时,LB处理改善了小鼠的糖代谢状况,缓解了长期高脂饮食引起的高胰岛素血症和葡萄糖不耐受,肥胖伴随的肝脂肪变性和脂肪组织炎症也得到了改善。对组织切片结果分析发现,LB处理组小鼠脂肪组织细胞大小显著减小（P<0.05）。LB处理组FAS、PPARγ、CEBPα等脂质合成相关基因的蛋白表达水平显著下调（P<0.05）,同时HSL和ATGL等脂解基因的蛋白表达水平显著上调（P<0.05）,表明LB是通过抑制脂肪合成并促进脂肪分解达到减少脂肪组织重量的作用;2.LB通过增强小鼠脂肪组织的产热作用发挥抗肥胖功效。LB能够抑制脂质蓄积,因此对小鼠脂肪组织进行脂肪酸组成分析,发现LB处理增加了棕色脂肪组织和白色脂肪组织中ω3多不饱和脂肪酸的比例（P<0.05）,猜测LB可能通过激活ω3多不饱和脂肪酸受体GPR120。通过组织和分子水平试验表明,LB处理可增加脂肪组织和原代棕色脂肪细胞中GPR120的mRNA和蛋白质水平表达（P<0.05）。同时对脂肪组织切片进行UCP1免疫荧光染色以及检测CPT1β、UCP1、PGC1α等产热相关基因的mRNA和蛋白表达,均显著增加（P<0.05）。研究表明,LB增强了棕色脂肪组织活力以及促进白色脂肪棕色化,增加了小鼠机体能量消耗。3.LB调控脂肪组织产热的机制研究。使用40μM LB处理原代棕色脂肪细胞,油红O染色及定量结果显示,LB处理显著促进原代棕色脂肪细胞分化（P<0.05）;同时LB处理后,UCP1和PGC1α的mRNA和蛋白水平均显著升高（P<0.05）。相反,当使用GPR120的特异性拮抗剂AH7614处理细胞时,LB的促产热作用消失,研究表明GPR120在LB促进产热过程中不可或缺。综上所述,本研究通过体内、体外试验明确LB在小鼠脂肪沉积中的作用,揭示LB通过激活GPR120抑制脂肪沉积的分子机制,最终阐明LB具有通过激活ω3PUFA-GPR120-UCP1轴来增强脂肪组织生热作用从而具备调控脂肪沉积的功能,为畜牧生产中的肉质改良及改善家畜繁殖性能提供思路和理论依据,同时为对抗肥胖症及其相关的代谢综合征提供科学依据。
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