“黄芪—当归”升高白细胞部位的提取工艺及质量标准研究

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黄芪与当归配伍应用有着相当久远的历史,在我国历代中医应用及书籍记载中二者配伍用于补气升血的案例很多。黄芪当归补血汤是最为经典也最常用的方剂之一,方中只有两味中药,即黄芪与当归。现代常应用此方治疗由于身体虚弱引起的气血两亏等症。随着现代药理学的不断发展,我们发现“黄芪-当归”配伍有较强的提高免疫系统作用,二者配伍能够有效的升高白细胞。而现今,恶性肿瘤放疗、化疗,慢性肝炎及其他原因所引发的白细胞减少症发病率逐渐升高,且现代西医对于此证无特殊治疗效果,中医药在这方面优势便凸显出来。中医将A细胞减少症划为“血虚”范畴,而黄芪-当归配伍的主要功效是补气升血,其在治疗白细胞减少症方面确实有着显著的效果。本课题以“黄芪-当归”配伍升高白细胞部位为切入点,试图优选出“黄芪-当归”的最佳提取工艺,研究中创新采用其对由环磷酰胺造模小鼠白细胞计数影响的药理效应作为质量标准,采用正交试验设计,对加水量、煎煮时间、浸泡时间以及提取次数四个因素进行研究,按照L9(34)正交表考察,应两种评价指标,最终确定最佳水煎煮工艺。在质量标准研究方面,定性鉴别中,分别对黄芪、当归进行了的薄层色谱鉴别,并选取了最佳的展开剂,试验结果表明色谱图分离度良好;应用高效液相色谱对提取液中阿魏酸进行了含量测定,方法学验证。最后进行指纹图谱的建立,通过对“黄芪-当归”供试液样品及对照品的高效液相图谱分析,确定了共有峰,验证共有峰的相对保留时间和相对峰面积的重现性较好;并对特征峰进行了峰归属分析。研究中优选出“黄芪-当归”升高白细胞部位提取工艺,并通过对其进行质量标准的研究证实该工艺稳定可行;质量标准中各项指标的检查方法经方法学研究表明重现性好、稳定性高,可用于“黄芪-当归”升高白细胞部位提取工艺的质量控制;对“黄芪-当归”药对进行指纹图谱的建立,分析峰归属,为今后此药对升高白细胞部位的彻底分离提取,制备成能够长期稳定性应用的剂型成药奠定理论基础。
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