APL是急性白血病的一种,都有t(15,17)的易位,形成了新的PML/RARα融合基因,编码PML/RARα融合蛋白,所以检测患者体内的PML/RARα融合蛋白的含量可以做为一种新的APL的诊断方法。首先通过调整各种单体用量和反应温度、时间等单因素条件,确定了最优化的实验方案。最佳反应条件为:反应温度70℃、AIBN加入量1g、苯乙烯加入量21g,制备了平均直径5.4微米的表面活性化的聚苯乙烯微球。扫描电镜显示微球表面光滑,直径在5.4μm左右,分散性好。接着使用FITC对微球进行了荧光编码,编码了三色微球,形成三元阵列,经流式细胞仪检验性能稳定。高亮微球包被N-19抗体,用来捕获PML/RARα融合蛋白。中亮微球包被c-abl 24-11抗体,用来捕获ABL参考蛋白。低亮微球包被CML融合蛋白BCR-ABL捕获抗体G6作为阴性对照。包被完成经洗涤后,将三色微球混合,再加入NB4细胞提取物共孵育。孵育完成后经洗涤重悬于缓冲液中,再加入RARαC-20抗体和c-abl H-300抗体共孵育。RARαC-20做为融合蛋白的报道抗体,c-abl H-300做为参考蛋白的报道抗体。最后再加入goat anti-rabbit lgG-PE抗体在缓冲液中共孵育。PE标记的抗体用来表示报道抗体结合到蛋白的水平,数值通过流式细胞仪定量的PE分子荧光强度来评价。样品使用Cell Quest Pro软件分析PE的荧光强度。实验结果表明该三元阵列中高亮阵列可以特异识别PML/RARα融合蛋白,并和样品浓度呈确定的线性关系。本实验有望开发一种基于液相芯片技术的新型的APL诊断试剂,期待能在临床诊断中发挥作用。