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随着生活水平的提高,人们饮食越来越多样化,食品安全问题逐渐被人们关注与重视,然而,世界范围内的食品安全恶性事故频繁爆发,食源性疾病的爆发率大幅上升,已引起了世界各地政府的关注,更给世界人民带来了巨大的痛苦和损失,因而如何快速、灵敏地检测出食源性致病菌的存在已成为控制食品安全问题的关键。近些年纳米技术日渐成熟,由于纳米材料独特的物理与化学特性,表面修饰化后的纳米粒子广泛应用于生物领域,涉及到生物化学、分子生物学、细胞生物学、基因组学、蛋白质组学、医学诊断及治疗、药物筛选和细菌检测标记等研究。食品因污染单核增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)而引起的食物中毒事件日渐增多,单核增生李斯特菌可引起人和动物的李斯特菌病,临床表现为人和动物脑膜炎、败血症及孕妇流产、胃肠炎等,尤以妊娠期妇女、新生儿及免疫功能低下的病人更易感染。本论文将核磁共振技术与纳米粒子的超顺磁性相结合,构建了一种快速检测单核增生李斯特菌的方法。第一部分研究了单核增生李斯特菌的最优培养基条件及计数方法。通过绘制生长曲线,得出最优培养基为李斯特氏增菌肉汤。通过比较稀释平板计数法与MPN计数法,可知MPN法计数效果较佳。第二部分成功合成了生物功能化氧化锰纳米粒子。首先通过高温热解法制备出以氧化锰为核心的磁性纳米粒子,再通过反相微乳液法将氧化锰纳米粒子成功包被上二氧化硅,并修饰上氨基,制备出氨基化的氧化锰纳米粒子,粒径约为30 nm。使用EDC·HCL与NHS活化的抗体成功将氨基化氧化锰纳米粒子免疫化,免疫化的纳米粒子蛋白质固定化能力较强。第三部分构建了一种高特异性、高灵敏度的单核增生李斯特菌(LM)的快速检测技术。偶联上单增李斯特菌的氧化锰纳米粒子能够特异性识别LM,这种特异性结合导致反应体系中纳米粒子分散程度发生变化,同时,溶液体系中的纵向弛豫时间也随之改变。为了提高检测的灵敏性,对检测体系的反应参数进行了优化研究,最终得出检测体系的最佳参数为:最优反应磁珠浓度为0.08mg/m L,最佳稳定剂为2%脱脂奶粉,最佳p H值为7.0,纳米粒子与LM细菌反应最佳孵育时间为30min。在最佳反应参数条件下,检测LM,得出此方法检测LM的线性范围为10~103CFU/m L。对含有LM的实样进行检测,结果表明IMS-LF-NMR检测方法可用于实样检测,并具有高度特异性。总而言之,本文构建了一种新型的食源性致病菌LM的快速、特异性检测方法,为纳米粒子进一步应用于食源性致病菌检测奠定了理论基础。关键字:单核增生李斯特菌,磁性纳米粒子,核磁共振技术,磁性弛豫