含银敷料对糖尿病人成纤维细胞毒性作用的体外观察研究

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背景和目的目前,由于抗生素和抗菌材料的使用已经进入瓶颈,大量的含银敷料开始广泛应用于慢性创面治疗中,预防和治疗创面感染。糖尿病足创面是最常见的慢性创面之一。所以,含银敷料也大量的应用于糖尿病足创面的治疗。但是,关于含银敷料是否对创面的愈合过程产生阻碍甚至毒性作用,国内外文献报道仍存在持续而激烈的争论。因为银离子被认为具有广谱杀菌作用,特别是针对慢性创面常见菌——革兰阳性细菌。局部外用抗菌措施不仅是通过广谱杀菌作用以控制创面感染,理想中也不应危害创面正常细胞的活性。特别对于糖尿病足创面,本来就因为宿主细胞的活性降低导致创面延迟或甚至不愈合,创面敷料对细胞可能产生的毒性作用就更应值得重视。然而,目前尚没有国内外文献研究报道含银敷料对糖尿病足创面愈合中所起的毒性作用。因此,本次研究拟以客观的实验设计,研究含银敷料对体外培养的糖尿病人成纤维细胞的毒性作用。材料和方法选取五种临床上常用的含银敷料,各配对组间的敷料的基础材料各不相同。商品名称分别缩写为:A-Ag, G-Ag, M-Ag, B-Ag, P-Ag,以及它们的不含银的对照敷料分别是:A,QM,B,P。相配对比较的两组敷料均从同一公司购买。在为糖尿病足创面患者行“清创术”或是“截趾术”时,收集术中去除的多余正常皮肤组织。剪除皮肤组织的表皮和皮下结缔组织,留下真皮组织分离与培养成纤维细胞。将成纤维细胞培养在含有一定浓度葡萄糖的培养液中培养并传代。因为要排除银敷料中其它成分可能对细胞的毒性作用,各敷料浸于细胞培养液中,并放置于培养箱中,然后分别测量第1天和第3天后培养液中的化学成分。培养液的化学成分作为对照组。然后将第二代糖尿病人成纤维细胞分别与各敷料共同培养3天后,观察并拍照糖尿病人成纤维细胞的形态,测定细胞数量,测量培养液中胶原含量。将同等数量的糖尿病人成纤维细胞单独培养3天后测量的上述数据,作为对照组。所有数据应用统计软件SPSS 13.0行统计学分析,方法采用配对T检验。结果1.各敷料浸于培养液中各1天和3天,检测出9种化学成分。实验组中仅有钙和银的浓度具有统计学差异。其中,各组内含银敷料组银的浓度均显著高于不含银敷料组和对照组。G-Ag组和G组的钙浓度均高于其它配对组。2.三天后,含银敷料组中成纤维细胞失去了细胞的典型形态,不含银敷料组和对照组中糖尿病人成纤维细胞仍保持纺锤状或树枝状。3.三天后,含银敷料组中细胞数量比不含银敷料组降低了54%-70%。4.三天后,含银敷料组培养液中胶原含量比不含银敷料组降低了48%-68%。结论1.含银敷料中的银成份对体外培养的糖尿病人成纤维细胞有毒性作用。2.含银敷料对糖尿病人成纤维细胞毒性作用与敷料中的银浓度有关。
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