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茄科雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum)又称青枯菌,由它引起的植物细菌性青枯病是一种十分典型的土传病害,该病原菌寄主范围广、适应能力强,严重威胁农业生产安全,并在全球范围内造成巨大的经济损失,因此研究和认知青枯菌的致病分子机理就显得尤为重要。青枯菌III型分泌系统相关的效应蛋白是其攻击植物免疫反应的重要武器,近年来一些青枯菌III型效应蛋白的生物功能被报道,但对那些在植物细胞核区域发挥功能的效应蛋白研究较少,因此本研究旨在筛选能够进入植物细胞核调控宿主免疫基因表达的效应蛋白并解析其作用机制,有望揭示病原细菌和寄主在植物细胞核内互作的新机制,并为植物抗青枯病分子育种提供新思路和新材料。本研究的主要结果如下:从青枯菌模式菌株GMI1000的III型效应蛋白中筛选到8个可能定位于细胞核且功能未知的效应蛋白,命名为Rip NE1-Rip NE8;检测了这些候选蛋白对免疫基因诱导表达的影响,发现有典型的核定位信号的Rip NE2对免疫基因FRK1和WRKY30的诱导表达抑制作用明显,同时对其它层次的免疫反应如活性氧的爆发也有抑制作用,还发现了Rip NE2的生物功能依赖于其核定位信号;构建超量表达Rip NE2的转基因拟南芥,发现其对青枯菌的抗病能力有一定程度降低,并且免疫相关基因的诱导表达也有不同程度的下调。以上结果说明Rip NE2对植物免疫反应有抑制作用,在青枯菌侵染植物时可能发挥重要作用。进而筛选鉴定了植物中Rip NE2的靶标蛋白,发现了水杨酸信号途径中的重要转录因子TGA2和Rip NE2互作;克隆了TGA家族中参与植物抗病反应的成员并分析与Rip NE2的互作关系,发现Rip NE2与第II分支的3个TGAs都有较强互作;Rip NE2转基因植物表现出了与tga2/5/6突变体相似的表型,如对高浓度的SA敏感、诱导抗性减弱和SA标志基因诱导表达下调。初步结果表明Rip NE2劫持了TGAs蛋白,干扰其生物功能进而影响SA信号抗病途径,而Rip NE2是如何负调控TGA转录复合体的分子功能还有待进一步探究。