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目的:心表面脂肪(Epicardial adipose tissue,EAT)炎症及氧化应激是近年心脏代谢性疾病领域研究的热点问题。EAT可分泌大量的炎症脂肪细胞因子,包括促炎因子:肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、单核细胞趋化因子-1(Monocytic chemotecmic peptide-1,MCP-1)、内脂素(Visfatin,VF)、趋化素(Chemerin,CHEM);抗炎因子:脂联素(Adiponectin,ADP)、白介素-10(Interleukin-10,IL-10)、爱帕琳肽(Apelin,APLN)、转化生长因子-β(Transforming growth factor-β,TGF-β);血管收缩因子:内皮素-1(Endothelin-1,ET-1)、血管紧张素原(Angiotensinogen,AGT);氧化应激标志物:诱导性一氧化氮合酶(Inductive nitric oxide synthase,i NOS)、内皮型一氧化氮合酶(Endothelial nitric oxide synthase,e NOS)、谷胱甘肽过氧化物酶-3(Glutathione peroxidase-3,GPX-3)。本论文拟探讨上述因子在血浆与EAT组织中的表达水平,与冠状动脉心脏病(Coronary artery disease,CAD)的患病及其临床因素的相关性,评价各炎性脂肪细胞因子在CAD诊断与病情评估中的价值。方法:连续入选2019年3月～2019年9月我院心脏外科住院,符合纳入标准的44例患者作为研究对象。依据冠状动脉造影术(Coronary angiograph,CAG)结果及手术术式分为2组,冠心病组:诊断CAD且行冠脉旁路移植术26例(60.96±8.88岁);非冠心病组:诊断心瓣膜病并排除CAD,行换瓣术18例(59.44±5.57岁)。心外科手术中留取血浆10m L,EAT与胸部皮下脂肪(Subcutaneous adipose tissue,SAT)标本各约100～200 mg。应用酶联免疫吸附法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测炎性脂肪细胞因子TNF-α、MCP-1、VF、CHEM、AGT、ET-1、i NOS、ADP、IL-10、TGF-β、APLN、GPX-3、e NOS的血浆浓度;Western Blotting法检测EAT组织中i NOS、e NOS蛋白表达量;病理学苏木精-伊红染色法(Hematoxylin-eosin staining,HE)比较EAT脂肪细胞形态与血管增生情况。结果:1临床特征比较:与非冠心病组相比,冠心病组胸痛、高血压、血脂异常比率较高[76.9(20/26)vs 11.1%(2/18);61.5%(16/26)vs 27.8%(5/18);78.3(18/26)vs47.1(8/18),差异有统计学意义(均P<0.05)]。2炎性脂肪细胞因子水平比较:2.1 ELISA法检测血浆促炎因子水平:冠心病组血浆TNF-α、MCP-1、VF、CHEM浓度均显著高于非冠心病:133.60(107.83,154.94)ng/L vs102.30(85.11,110.45)ng/L;35.21(30.75,42.91)ng/L vs27.86(22.87,30.00)ng/L;79.78(70.82,98.97)pg/m L vs69.05(65.14,78.91)pg/m L;7.83(6.54,9.51)ng/L vs6.73(6.13,7.65)ng/L,差异有统计学意义(均P<0.05)。2.2 ELISA法检测血浆抗炎因子水平:冠心病组血浆ADP、IL-10、TGF-β、APLN浓度均显著低于非冠心病组,321.10(282.75,348.35)pg/m L vs361.60(353.75,395.25)pg/m L;92.07(79.41,95.06)ng/L vs99.18(85.94,108.35)ng/L;1030.00(824.95,1183.50)pg/m L vs1173.10(995.85,1613.50)pg/m L;922.00(832.00,995.5)ng/m L vs963.10(931.80,1070.85)ng/m L,差异有统计学意义(均P<0.05)。2.3 ELISA法检测血浆氧化应激相关因子水平:冠心病组血浆i NOS浓度显著高于非冠心病组,3.29(3.03,3.62)umol/L vs3.07(2.50,3.27)umol/L;冠心病组血浆GPX-3、e NOS浓度显著低于非冠心病组,3.29(3.03,3.62)pmol/m L vs3.67(3.22,4.26)pmol/m L;1.96(1.75,2.37)umol/L vs2.62(1.95,2.88)umol/L,差异有统计学意义(均P<0.05)。2.4 ELISA法检测血浆血管功能相关因子水平:冠心病组血浆AGT、ET-1血浆浓度显著高于非冠心病组,60.12(48.20,68.28)ng/m L vs45.52(42.86,48.51)ng/m L;39.22(37.04,43.95)pg/m L vs36.58(33.60,39.25)pg/m L,差异有统计学意义(均P<0.05)。2.5 Western Blotting法检测EAT组织中蛋白质表达水平:冠心病组EAT中i NOS表达及i NOS/e NOS比值显著高于非冠心病组,分别为:1.09(0.85,1.25)vs0.53(0.48,0.09);1.55(1.17,2.42)vs0.55(0.48,0.78),差异有统计学意义(均P<0.05)。而EAT中e NOS蛋白表达量低于非冠心病组,为0.66(0.41,0.85)vs 1.03(0.84,1.27),差异有统计学意义(P<0.05)。3血浆中炎性脂肪细胞因子水平及与临床特征的相关性:3.1血浆炎性脂肪细胞因子间的相关性因子间呈正相关:AGT水平与TNF-α、MCP-1、VF、CHEM呈正相关,Rs分别为:0.472、0.310、0.561、0.473;TNF-α水平与MCP-1、VF、ET-1、i NOS呈正相关,Rs分别为:0.573、0.533、0.313、0.416;MCP-1水平与VF呈正相关,Rs为:0.415;VF水平与CHEM、IL-10呈正相关,Rs分别为:0.459、0.339;CHEM水平与ET-1、i NOS呈正相关,Rs分别为:0.331、0.592;ET-1水平与i NOS呈正相关,Rs为:0.356;ADP水平与IL-10、APLN、GPX-3、e NOS呈正相关,Rs分别为:0.561、0.358、0.432、0.432;IL-10水平与TGF-β、APLN呈正相关,Rs分别为:0.467、0.573;TGF-β水平与APLN呈正相关,Rs为:0.531;APLN水平与e NOS呈正相关,Rs为:0.358;差异均有统计学意义(均P<0.05)。因子间呈负相关:MCP-1水平与ADP、IL-10呈负相关,RS分别为:-0.374、-0.315;ET-1水平与IL-10呈负相关,Rs为:-0.306;差异均有统计学意义(均P<0.05);3.2血浆炎性脂肪细胞因子与临床特征间的相关性因子与临床特征指标呈正相关:TNF-α水平与胸痛、CK、CK-MB、Tn-I呈正相关,RS分别为:0.366、0.436、0.371、0.385;MCP-1水平与胸痛呈正相关,Rs为0.391;AGT与LA呈正相关,Rs为-0.349;GPX-3与房颤、LA呈正相关,Rs分别为:0.295、0.509;ADP与房颤、血清甘油三酯、血清FT3呈正相关,Rs分别为:0.406、0.320、0.357;IL-10与低密度脂蛋白、血清FT3呈正相关,Rs分别为:0.347、0.603;ET-1与外周血淋巴细胞呈正相关,Rs为0.494;e NOS与FT3呈正相关,Rs为0.722;差异均有统计学意义(均P<0.05)。因子与临床特征指标呈负相关:TNF-α水平与血清总蛋白、血清白蛋白呈负相关,Rs分别为-0.326、-0.413;MCP-1水平与LA呈负相关,Rs为-0.311;VF与LA、血清总蛋白呈负相关,Rs分别为-0.311、-3.42;CHEM与舒张压、LA、血清总蛋白、血清尿酸呈负相关,Rs分别为:-0.333、-0.63、-0.381、-0.349;GPX-3与高血压、外周血中性粒细胞、FT4呈负相关,Rs分别为-0.285、-0.332、-0.344;i NOS与血清总蛋白、血清白蛋白、血清BUN呈负相关,Rs分别为:-0.467、-0.344、-0.345;ADP与胸痛、高血压、血脂异常、AST呈负相关,Rs分别为:-0.372、-0.346、-0.291、-0.425;IL-10与高血压、AST呈负相关,Rs分别为:-0.270、-0.421;TGF-β与血清AST、血清CK呈负相关,Rs分别为:-0.350、-0.413;ET-1与LA、血清总蛋白、血清白蛋白呈负相关,Rs分别:-0.397、-0.429、-0.364;e NOS与AST、血糖、Cr呈负相关,Rs分别为:-0.391、-0.431、0.327;差异均有统计学意义(均P<0.05)。4各因子的诊断试验4.1血浆中促炎脂肪细胞因子:TNF-α、MCP-1、VF、CHEM、ET-1、AGT、i NOS水平提示诊断CAD的曲线下面积分别为:0.845(95%CI:0.728-0.962)、0.833(95%CI:0.709-0.956)、0.763(95%CI:0.615-0.910)、0.703(95%CI:0.542-0.863)、0.708(95%CI:0.537-0.878)、0.865(95%CI:0.748-0.982)、0.697(95%CI:0.529-0.864),差异有统计学意义(均P<0.05);最佳诊断的界值分别为:120.15ng/L、30.44 ng/L、69.31 pg/m L、7.59 ng/L、37.93 pg/m L、46.56 ng/m L、2.84umol/L,灵敏度分别为:64.00%、80.00%、88.00%、60.00%、72.00%、92.00%、92.00%,特异度分别为:93.75%、81.25%、52.95%、76.47%、70.59%、70.59%、47.06%。4.2血浆中抗炎脂肪细胞因子:ADP、IL-10、TGF-β、APLN、GPX-3、e NOS浓度提示诊断CAD患者的曲线下面积分别为:0.874(95%CI:0.770-0.978)、0.722(95%CI:0.565-0.880)、0.705(95%CI:0.538-0.872)、0.708(95%CI:0.552-0.865)、0.712(95%CI:0.549-0.875)、0.689(95%CI:0.519-0.859),差异有统计学意义(均P<0.05);最佳诊断的界值分别为:346.10pg/m L、95.67ng/L、1276.50pg/m L、934.55ng/m L、3.85pmol/m L、2.43umol/L,灵敏度分别为:76.00%、88.00%、92.00%、60.00%、96.00%、80.00%,特异度分别为:88.24%、58.82%、47.06%、76.47%、41.18%、64.71%。5 HE染色结果EAT脂肪细胞面积小于SAT脂肪细胞面积(2822.52±765.83μm2 vs3495.48±854.82μm2),差异有统计学意义(P<0.05);EAT组织中血管数量多于SAT脂肪组织中血管数量(3.90±1.36 vs 2.62±1.00),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1 EAT炎症及氧化应激反应与CAD的发病相关,为CAD的发病机制之一。2新近发现的血浆炎性脂肪细胞因子CHEM、VF、ET-1、AGT、i NOS、APLN、TGF-β、GPX-3、IL-10、e NOS,有望成为辅助CAD诊断的重要生物学标志物,与经典因子TNF-α、MCP-1、ADP比较,诊断效能接近。3 EAT分泌的生物学标志物可能成为CAD临床治疗的新靶点。