熊果酸通过抑制HIF-1α下调甲状腺癌TPC-1细胞中Survivin及VEGF的表达

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目的:探讨低氧环境下熊果酸(ursolic acid,UA)对甲状腺乳头状癌TPC-1细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭的影响和细胞中缺氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)、生存素(Survivin)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达情况及其受UA影响后的表达变化。方法:将TPC-1细胞分为A组:低氧对照组;B组:UA低浓度组(4μmol/L)及C组:UA高浓度组(8μmol/L),在常氧及低氧环境下对TPC-1细胞进行培养及药物干预。1.将TPC-1细胞用不同浓度的UA(0、2、4、8、16、32μmol/L)分别进行干预24h、48h后,应用CCK-8试剂测定UA对细胞的增殖抑制能力。2.将TPC-1细胞用不同浓度的UA(0、4、8μmol/L)干预24h后,应用流式细胞术测定细胞凋亡情况。3.将TPC-1细胞用不同浓度的UA(0、4、8μmol/L)干预24h后,应用细胞划痕实验检测药物对细胞迁移能力的影响。4.将TPC-1细胞用不同浓度的UA(0、4、8μmol/L)干预24h后,应用Transwell小室测定药物对细胞迁袭力的影响。5.将TPC-1细胞用不同浓度的UA(0、4、8μmol/L)干预24h后,应用间接免疫荧光法染色,流式细胞术检测细胞中HIF-1α、Survivin、VEGF的蛋白表达情况。6.将TPC-1细胞用不同浓度的UA(0、4、8μmol/L)干预24h后,采用qRT-PCR法检测细胞中HIF-1α、Survivin、VEGF的m RNA的表达情况。结果:1.细胞增殖抑制率在低氧环境下呈浓度依赖性增加,相应组间对比具有统计学差异(P<0.05)。2.应用流式细胞术测定各组凋亡结果:UA可有效诱导TPC-1细胞的凋亡,且随药物浓度的增高,TPC-1细胞凋亡率逐渐升高(A
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