【摘 要】
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目的：应用RNAi(RNA interference)技术探讨靶向MyD88的shRNA质粒载体抑制大鼠骨髓源树突状细胞(Dendritic Cell, DC) MyD88基因表达的可行性。方法：采用培养基选择法经体外培养
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目的：应用RNAi(RNA interference)技术探讨靶向MyD88的shRNA质粒载体抑制大鼠骨髓源树突状细胞(Dendritic Cell, DC) MyD88基因表达的可行性。方法：采用培养基选择法经体外培养大鼠骨髓源DC；流式细胞仪检测DC表面抗原MHC-Ⅱ和OX-62表达情况；经体外设计合成针对MyD88 mRNA序列特异性MyD88 shRNA3条,并分别构建于Pgenesil.1质粒,提取重组质粒进行酶切鉴定并测序；实验分为空白对照组、GenePorter 3000组、pHK-shRNA组、pMyD88 1-shRNA组、pMyD88 2-shRNA组和1pMyD88 3-shRNA组等六个组别。在阳离子脂质体转染剂介导下转染DC；荧光实时定量PCR检测转染后MyD88 mRNA表达水平的变化：WesternBlot技术检测转染后MyD88蛋白表达水平的变化。使用SPSS 17.0 for Windows进行数据分析。结果：经体外培养,每只大鼠可获得1.0×107个DC；经测序结果分析pMyD881-shRNA、pMyD882-shRNA、pMyD883-shRNA均为插入正确的克隆质粒；荧光实时定量PCR检测显示构建的3个pMyD88-shRNA质粒通过脂质体转染大鼠骨髓源DC,均能不同程度地抑制MyD88的表达,与对照组具有显著差异(P<0.01),其中pMyD88 1-shRNA质粒组的抑制作用最为明显,GenePorter 3000组与pHK-shRNA质粒对照组间MyD88的mRNA转录水平无显性差异(P>0.05); WesternBlot检测显示3个MyD88-shRNA质粒组中DC转染后MyD88蛋白的的表达水平均较对照组明显降低(P<0.01),与对照组有显著性差异,其中pMyD881-shRNA质粒组抑制蛋白表达作用最为明显,空白对照组、GenePorter3000组与pHK-shRNA质粒对照组间MyD88蛋白表达水平无显著性差异(P>0.05)；结论：经体外培养可收获大量大鼠骨髓源DC,形态典型。在细胞培养第12天,经流式细胞仪检测,其MHC-Ⅱ和OX-62抗原表达分别为91.36%和72.70%。与空白对照组、GenePorter 3000组与pHK-shRNA质粒对照组相比,pMyD88-shRNA质粒组可高效、特异地抑制MyD88基因的mRNA和其蛋白的表达,而其中pMyD881-shRNA质粒抑制效率更高,可用于下一步实验研究。
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目的:探讨血胆红素与缺血性脑卒中发病、分型、病情及预后之间的相关性。方法:选择2014年1月至2015年12月期间于广西中医药大学附属瑞康医院神经内科住院的脑梗死急性期患者8
“创新是一个民族进步的灵魂，是国家兴旺发达的不竭动力。”这是一句饱含对历史深沉的审视，对现实冷静的洞察，对未来辩证的思索的至理名言。民族创新精神的培养，创新潜能的开发，基础在教育，关键在教育。所以有人说，创新就是教育的终极存在的价值所在，就是教育的真谛所在，要义所在。 在实际教学过程中对学生创新能力的培养,已引起广大数学教师的高度重视,如何培养学生创新能力,找到培养和发展学生创新能力的有效途径,在
参加教育工作十年，特别是担任班主任六年以来，在学校领导的指导和广大同事的帮助下，无论我的教学还是班主任工作，都取得了一些成绩。下面我从四个方面向大家作汇报一下我的班主任工作。 一、用目标凝聚人心 我的治班理念是：用热情去工作，用真诚来沟通，用知识教学生，用人品育栋梁。 我的治班方针：公平、民主。 我的治班策略：（一）、培养主动学习的习惯； （二）、树立快乐学习的心态； （三）、创造轻松
在化学教学中，如何转化差生，经过几年的实践，摸索到几点经验，取得了显著效果。体会主要有以下幾方面 一、调查摸底是基础 每接一届新生，要做的第一件事，是调查摸底，了解学生，如查看各科成绩，召开学生座谈会，调查问卷，家访，与学生谈心等。 调查了解中发现，导至学生学习差的原因固然是多方面的，但学生和教师方面的原因是主要的。这里既有学生学习方法和习惯、学习心理及智商因素，更有教师素质、教法等因素。差
人们赞美教师是人类灵魂的工程师，人类灵魂的工程师面对的不是钢筋水泥，建造的是不高楼大厦，而是要培养高素质的人才。他们的主要工作手段是语言和知识。教师必须锤炼自己的语言技巧，提高语言的感召力、说服力、冲击力、鼓动力。夸美纽斯说过：“教师的嘴是一个源泉，从那里可以产生知识的溪流”。对于班主任来说，语言艺术更为重要。班主任将自己内在的知识、思想，外化为语言(包括动作、表情)作用于学生，使他们不仅领会，并
摘要：爱心就要靠爱心来成就，每一位学生都渴望得到老师的爱，尤其是那些家庭有过特殊变故的学生，容易形成特别心理，针对这些学生，我以真诚去面对他们，热情的鼓励他们，耐心地帮助他们，用师爱的温情去融化他们内心世界的每个角落。 关键词：爱心 教育 学生 多年来，我一直担任高年级班主任工作，我当班主任工作的指导思想是：热爱、尊重、信任、培养和发展学生。在教书育人中力争做到：面向全体学生，公正、公平地
摘要：本文主要论述高中化学新模式教育教学问题，首先介绍了传统教学的内容，阐述了传统高中化学教育教学存在的缺陷，介绍了高中化学教育教学新的模式运作样式及理论基础，在新模式教学观念与教学策略进行了转念变化。 关键词：新模式 探讨 化学教学 在化学概念教学实践中，要关注学生原有的认知结构，并采用多种方法，提供各种直观的、具体的范例，为新学的概念找到固定点；帮助学生将新学概念融入原有的认知结构中，
摘要：青少年逆反心理的形成,主要有青少年的生理成熟和心理成熟的“异时性”、自我意识的觉醒等自身发展原因,也有学校和家庭教育、社会影响等客观原因。叛逆心理虽然是青少年成长过程中出现的一种心理状态，但是当它成为他们的一种稳定的心理特征时，具有反社会倾向，若没有得到正确的引导，就有可能导致青少年的偏执、冷漠、不合群等性格，严重者会出现激烈的反社会行为，走上违法犯罪的道路。 关键词：青少年、叛逆心理、青
摘要：教育改革需要创新型美术教师人才。以更好地迎合我国社会经济发展的需求，促进我国基础教育改革顺利进行。加强学生多元文化及对课程研究能力的培养等方面的分析阐述，归纳了高师创新型美术教师人才的培养模式。 关键词：新课程教育改革 美术教育专业 创新美术教师人才 著名心理学家、教育家、北师大教授林崇德说：“研究创新教育、培养开拓人才。”这也是所有教师的愿望，在教学改革中发掘美术学术优势，培养创新