流式荧光法、多肿瘤标志物蛋白芯片和TK1在头颈部肿瘤的临床研究

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肿瘤标志物(Tumor marker TM)是指在恶性肿瘤发生和增殖过程中,由肿瘤细胞的基因表达而合成分泌的或是机体对肿瘤反应而异常产生和/或升高的,反映肿瘤存在和生长的一类物质,包括蛋白质、激素酶(同工酶)、胺类及癌基因产物等。TM存在于病人的血液、体液、细胞或组织中,可用免疫学、生物化学及分子生物学等方法测定,且对肿瘤的辅助诊断、鉴别诊断、观察疗效、监测复发及预后评价具有一定的价值。   流式荧光法,是激光激发荧光的发光类技术之一,又称液态芯片、悬浮阵列,是一个高速度、高通量以及多功能生物技术平台,它把激光技术、编码微球(Code beads)和最新的高速数字信号处理器进行了有机的整合,造就了其卓越的检测特异性和灵敏度,广泛应用于免疫分析和核酸研究,得到医学界和权威机构的高度认可,是临床诊断领域和生命科学研究中的热点。而单一的肿瘤标志物检查难以达到理想的灵敏度和特异性,国内外多项研究表明,运用多种肿瘤标志物联合检测,将有助于提高灵敏度和特异性。肿瘤患者血清胸苷激酶-1浓度检测是近年来研究的热点之一,已在多数恶性肿瘤的诊断、疗效、预后等方面显示其独有的优势,我们试图通过用流式荧光法、胸苷激酶-1(TK1)试剂盒与多肿瘤标志物蛋白芯片(MTMPC)检测系统对头颈部恶性肿瘤患者的血清进行检测,探讨头颈部恶性肿瘤患者中TK1及其他相关肿瘤标志物的表达情况。   目的:   探讨流式荧光法、多肿瘤标志物蛋白芯片技术和TK1在头颈部恶性肿瘤诊断及治疗中的价值。   方法:   本课题运用了流式荧光法检测了4例头颈恶性肿瘤患者血清中癌胚抗原(CEA)、细胞角质素片段19(CY211)和癌抗原125(CA125)等多肿瘤标志物的浓度水平,就该检测技术进行了方法学评价,并与多肿瘤标志物蛋白芯片(MTMPC)检测系统中检测出的相应的三项肿瘤标志物浓度进行了比较分析。   2.本课题利用抗TK1单克隆抗体建立的免疫印迹增强化学发光法检测20例初治鼻咽癌患者治疗前及治疗后的血清中TK1浓度和20例对照组(正常体检健康人)的血清TK1浓度并采用免疫酶标法检测血清中VCA-IgA水平。   结果:   1.CEA+CY211+CA125检测的方法学评价:最低检测限分别是0.0694ng/ml、0.7712ng/ml和0.6461U/ml,远低于极限(cutoff)值;干扰试验结果表明,在一份低值血清样本中加入高浓度的血红蛋白、甘油三酯、胆红素三种干扰物质,并不会影响结果的判断;批内变异系数和批间异系数均小于10%;在测定范围内,流式荧光法测定CEA、CY211和CA125三种肿瘤标志物的线性良好;流式荧光法与多肿瘤标志物蛋白芯片(MTMPC)检测系统中检测的三种指标相关性良好。   2.鼻咽癌组治疗前STK1浓度2.65(0.90-2.83)pmol/L明显高于健康体检者的STK1浓度0.62(0.23-4.38)pmol/L;鼻咽癌治疗后组STK1浓度1.25(0.25-7.34)pmol/L比鼻咽癌组治疗前STK1浓度2.65(0.90-2.83)pmol/L明显下降;鼻咽癌患者中血清TK1阳性率75.7%与VCA-IgA检出阳性率82.3%相近,鼻咽癌患者治疗后TK1阳性率(32.4%)明显低于VCA-IgA阳性率(75.7%)。   结论:   1.流式荧光法具有线性范围广、灵敏度高、重复性好、节省时间和样品等优点,具有临床应用潜力。   2.血清TK1检测在鼻咽癌患者的临床诊断中具有一定临床意义;血清TK1检测与VCA-IgA检测在鼻咽癌的诊断上未见明显差异,但在鼻咽癌患者疗效评估方面血清TK1可能比VCA-1gA有更高的应用价值。
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