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目的：研究Sox2蛋白在乳腺癌ZR7530细胞株中的细胞生物学行为，并通过寻找ZR7530中与SOX2相关的miRNA，进一步探讨乳腺癌恶性事件中可能涉及的分子机制。方法：1、利用Western blotting从蛋白水平检测Sox2的表达情况，以验证所构建的ZR7530Sox2沉默、过量表达及对照三个稳定细胞系；2、采用细胞计数、平板克隆形成实验观察ZR7530细胞增殖及成瘤能力，通过损伤修复实验检测肿瘤细胞的迁移能力；并进一步皮下接种肿瘤细胞，每三天测量一次裸鼠肿瘤体积；此外，通过尾静脉注射肿瘤细胞，八周后处死裸鼠，取肺组织行HE染色，检测肿瘤细胞的转移能力；3、应用miRNA芯片(miRCURY LNA Expression Array (v.18.0))检测与Sox2相关的差异表达miRNA，利用SAM软件将变化倍数Sox2-KD/Scramble或pCDH-Sox2/Scramble≤0.5或≥2的视为差异表达miRNA，对筛选出的差异表达miRNAs利用数据库TargetScan、miRDB、PicTar、miRanda分析相应的靶基因。结果：1、与对照组相比，ZR7530Sox2-KD细胞中Sox2蛋白表达水平明显下降(P=0.0480)，ZR7530pCDH-Sox2的Sox2蛋白表达量显著提高(P=0.0296)。2、细胞计数实验结果显示：72h开始，pCDH-Sox2与Scramble相比细胞增殖能力提高，且差异具有统计学意义（P=0.0106, P0.05）；96h时，pCDH-Sox2与Scramble相比，差异亦具有统计学意义（P=0.0021,P0.01）；而Sox2-KD增殖虽比Scramble略减，但直到96h差异仍无统计学意义（P=0.1179，P0.05）。平板克隆实验结果：计数直径0.5mm的克隆结果显示，与对照组相比，Sox2-KD组克隆数明显减少，且差异具有统计学意义（P=0.0377,P0.05），而Sox2过量表达的ZR7530细胞克隆数目虽有增加，但效果不明显，差异无统计学意义（P=0.4401,P0.05）。损伤修复实验结果：与对照组相比较，SOX2过量表达组24h前迁移不明显，24h后细胞迁移开始增多，48h时，与对照相比迁移能力提高（P=0.0379，P0.05）；SOX2沉默组细胞迁移较慢，但差异不显著（P=0.9738，P0.05）。体内成瘤实验结果：接种ZR7530pCDH-Sox2的裸鼠成瘤后肿瘤生长迅速（P=0.0057，P0.01），Sox2沉默组与对照相比，肿瘤生长速度减慢（P=0.0220，P0.05）。肿瘤细胞裸鼠肺转移结果：注射ZR7530pCDH-Sox2的裸鼠肺组织镜下可见大面积转移灶（P=0.0055,P0.01），而注射ZR7530Sox2-KD的裸鼠肺内转移灶较少（P=0.3894,P0.05）。3、根据miRNA芯片检测结果，将ZR7530Sox2-KD、ZR7530pCDH-Sox2分别与ZR7530Scramble相比，结果Sox2-KD与Scramble比较共筛选出91种差异表达miRNAs，其中49种miRNAs表达上调，42种表达下调；此外，pCDH-Sox2与Scramble比较共筛得251个差异表达miRNAs，其中136个miRNAs表达上调，115个表达下调。结论：1、验证了前期构建的ZR7530Scramble、Sox2-KD及pCDH-Sox2三个细胞系；2、Sox2在体外可促进乳腺癌ZR7530细胞的增殖、克隆形成及迁移；3、Sox2在体内亦可促进乳腺癌ZR7530细胞的生长及转移；4、Sox2调节某些miRNAs的表达，可能在乳腺癌恶性进程中起重要作用。