几种诱导子对铁皮石斛原球茎生物活性物质积累的影响

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铁皮石斛是我国传统的珍稀药用植物,具有极高药用价值。但因野生资源的匮乏和栽培产量及质量的问题,使产品生产的原材料短缺,限制着工业化生产的发展。因此,本研究利用植物细胞培养工程的手段,通过研究几种诱导子对铁皮石斛原球茎生物活性物质积累的影响,旨在为工业化生产提供一种新的原材料打下基础。本研究对壳聚糖、普鲁兰、水杨酸(SA)和茉莉酸甲酯(MeJA)等四种诱导子的适宜浓度和处理时间进行了筛选,并通过测定铁皮石斛原球茎的DPPH自由基清除能力,还原力和金属螯合能力对其抗氧化活性进行评价。.采用悬浮培养的方法,通过研究四种诱导子浓度对原球茎内生物活性物质积累的影响,发现壳聚糖浓度为30mg.L-1,普鲁兰为200mg·L-1,水杨酸(SA)和茉莉酸甲酯(MeJA)均为75μM时有利于原球茎中生物碱、多糖、黄酮和酚的积累。对四种诱导子及诱导子间混合使用效果进行比较的结果发现75 μM MeJA效果最佳。利用反应器培养原球茎过程中,研究了 MeJA处理时间对原球茎生物量和生物活性物质积累的影响,发现在原球茎反应器培养30 d时加入75μM的MeJA处理4 d为最佳的处理时间,原球茎多糖含量达386.7 mg·g-1,生物碱为269.45μg·g-1,黄酮为5.1 mg·g-1,酚为4.3 mg·g-1,这些物质的生产量也均达到最高。对反应器培养原球茎和铁皮石斛栽培植株抗氧化活性进行比较的结果,不同材料间抗氧化活性有明显差异。DPPH自由基清除能力和还原力由高到低顺序为MeJA处理的原球茎>栽培植株>MeJA未处理的原球茎。金属螯合能力为:MeJA处理的原球茎>MeJA未处理的原球茎>栽培植株。说明经MeJA处理后原球茎中生物活性物质积累增加,导致其抗氧化活性提高。因此,利用生物反应器大量培养原球茎,并利用诱导子促进原球茎中生物活性物质的积累的方法有利于铁皮石斛产品的商业化生产及开发。
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