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本研究在大样本收集中国人HNPCC家系基础上，对HNPCC表型、分子变异机制进行研究，并将研究成果应用于临床HNPCC筛选，以期提高HNPCC研究水平和临床诊疗水平。 第一部分 中国人遗传性非息肉病性结直肠癌临床病理特征研究 在知情同意的前提下，收集了符合Amsterdam标准的HNPCC家系31个167例患者(HNPCC组)、其中结直肠癌患者135例，并与符合疑似HNPCC标准的非典型HNPCC 20个家系40例患者(sHNPCC组)、124例散发性结直肠癌(sCRC组)比较。性别：男女比为71：64。年龄：HNPCC组48.6岁(范围22-78)、sHNPCC组49.8岁(范围26-75)、sCRC组54.8岁(22-80)。肿瘤部位：HNPCC组 升结肠癌43例(31.9％)、横结肠癌20例(14.8％)、降结肠癌11例(8.1％)、乙状结肠癌9例(6.7％)直肠癌52例(38.5％)；sHNPCC组升结肠癌2例(5.0％)、横结肠癌2例(5.0％)、乙状结肠癌4例(10.0％)、直肠癌32例(80.0％)；散发性结直肠癌组 升结肠癌21例(16.9％)、横结肠癌6例(4.8％)、降结肠癌14例(11.3％)、乙状结肠癌21例(16.9％)直肠癌62例(38.5％)；病理类型：HNPCC组腺癌108例(80.0％)、黏液癌24例(17.8％)、混合型3例(2.2％)；sHNPCC组 腺癌36例(90.0％)、黏液癌4例(10.0％)；sCRC组 腺癌112例(90.3％)、黏液癌9例(7.3％)、混合型3例(2.4％)。Dukes分期：HNPCC组Dukes A期4例(2.9％)、DukesB期64例(47.4％)、Dukes C期39例(28.9％)、Dukes D期28例(20.7％)；sHNPCC组Dukes B期20例(50.0％)、Dukes C期109例(25.0％)、Dukes D期10例(25.0％)；sCRC组Dukes B期38例(30.6％)、Dukes C期56例(45.2％)、Dukes D期30例(24.2％)。生存率：HNPCC组3年70.3％、5年49.9％、10年39.7％；sHNPCC组3年72.5％、5年54.1％、10年31.0％；sCRC组3年68.5％、5年44.3％。以上特征比较：HNPCC组与sHNPCC组比较，除肿瘤部位以外其余肿瘤特征差异无显著意义，HNPCC和sHNPCC特征与sCRC比较，除性别以外，以上所有特征差异有显著意义。 31家系167例患者共发生190例次肿瘤中，结直肠癌147例(77.37％)，胃癌11例(5.79％)，子宫内膜癌10例(5.26％)，卵巢癌5例(2.63％)，脑胶质瘤和乳腺癌各3例(1.58％)，肺癌、膀胱癌、皮肤癌和肝癌各2例(1.05％)，小肠癌和胆囊癌各1例(0.53％)。HNPCC相关首发肿瘤累计发病风险为：结直肠癌93.3％、胃癌28.1％、子宫内膜癌23.3％、脑肿瘤9.8％、肝胆胰肿瘤6.1％、卵巢癌3.9％、膀胱癌3.8％、乳腺癌2.8％、第二军医大学详细中文摘要博l:论文总肠外肿瘤56.1%;HNPCC相关肿瘤累计发病风险为:结直肠癌96.5%、胃癌29.9%、子宫内膜癌24.8%、脑肿瘤10.9%、肝胆胰肿瘤7.1%、卵巢癌5.6%、膀胧癌1.4%、乳腺癌3.8%、总肠外肿瘤76.1%。第二部分中国人遗传性非息肉病性结直肠癌家系hMLHI和hMSHZ基因种系突变及其表型分析研究一、中国人遗传性非息肉病性结直肠癌家系中错配修复基hMIJHI和hMSHZ基因种系突变 在知情同意的基础上抽取11个HNPCC家系和6个SHNPCC家系的外周血，抽提基因组DNA，设计hMLHI及hMSHZ基因的35个外显子引物，银染PCR一SSCP结合测序方法检测35个外显子突变。n个HNPCC家系共发现hMLHI及hMSHZ基因种系突变6个、6个sHNPCC家系共发现hMLHI及hMSHZ基因种系突变3个。11个HNPCC家系成LHI及成SHZ检测到突变为:C4家系:PCR一SSCP发现hMLHI第18外显子有异常条带。测序证实hMLHI第18外显子2081位T插入，导致无义突变。Cll家系:PCR一SSCP未发现hMLHI异常条带，发现hMSHZ第13外显子有异常条带，发现hMSHZ第13外显子有异常条带，测序证实2107位G一A变异，导致703位丝氨酸(Ser)变为苏氨酸(Tyr)。C13家系:PCR一SSCP发现hMSHZ第n外显子有异常条带，测序证实1760位A突变为C，导致587位苏氨酸 (Tyr)变异为半肤氨酸(CyS)。C51家系:hMLHI基因第19外显子2209位C插入导致下游发生移码突变。C52家系:hMLHI基因第18外显子2069位G一C，导致699位精氨酸 (Arg)变异为谷氨酸(Glu)。C58家系:hMSHZ基因第12内含C一T杂合，是否有功能需要进一步验证。6个疑似HNPCC家系检测结果:C1家系:PCR一SSCP检测hMLHI第1外显子有异常条带，测序证实为hMLHI基因46位GTG一ATG杂合峰，为撷氨酸(Val)变为蛋氨酸(Met)。CZ家系:hMLHI基因第18外显子2069位G一C错义突变，导致699位精氨酸(Arg)变异为谷氨酸(Glu)。C8家系:PCR一SSCp检测卜MLHI第12外显子有异常条带，测序证实为hMLHI基因1 364位C插入导致下游发生移码突变。在发现的9个突变中，hMLHI突变为7个，而且有3个突变位于hMLHI第18外显子，提示在中国人朋匹C中，hMLHI基因突变多见，而且hMLHI第18外显子突变较多为中国人日NPCC错配修复基因突变的特征。研究二、中国人遗传性非息肉病性结直肠癌患者微卫星不稳定性研究 以12个H汉PCC家系12例先证者作研究对象，取16例散发性结直肠癌患者作为对第二军医大学详细中文摘要博_上论文照组，抽提患者外周血及肿瘤标本基因组DNA，设计微卫星标志BAT一26、BAT一25、DZS 123、D55346及D17S25O的PCR引物，银染，PCR一SSCP检测患者外周血及肿瘤的微卫星标志的差异，5个微卫星标志中2个以上阳性则