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目的:吉祥草和余甘子均收载于《贵州十大苗药研究》，吉祥草具有清肺止咳、解毒利咽、凉血止血等作用;余甘子具有润肺化痰、清热利咽、生津止渴之功效。文献及临床研究表明两药配伍对非小细胞肺癌(NSCLC)有明确的治疗作用。通过本课题研究，探索吉祥草和余甘子配伍后治疗非小细胞肺癌的药效物质，旨在吉祥草配伍余甘子在抗肿瘤制剂开发方面的研究提供实验依据。
方法:①鲜药榨汁、传统水煎、渗漉为提取方法制得吉祥草配伍余甘子的不同提取物，以Lewis细胞体外实验模型作为评价手段，优选药材的最佳提取方法。②通过膜分离技术，将最佳提取方法的提取物分段截留得到不同分子量区间段组分，以Lewis细胞体外实验模型作为评价手段优选最佳的分子量区间段。③建立总酚酸、总黄酮、总皂苷的含量测定方法。测定各个分子量区间段总酚酸、总黄酮、总皂苷含量，分析总酚酸、总黄酮、总皂苷在各分子量区间段的富集情况及其对Lewis细胞增殖抑制作用的相关性。④通过甲状腺素加利血平法结合内毒素滴鼻致热建立与临床证候相吻合的小鼠阴虚毒热型模型并且进行评价，为研究吉祥草配伍余甘子抗阴虚毒热型非小细胞肺癌药效学验证提供稳定可靠的模型。⑤以小鼠阴虚毒热型非小细胞肺癌模型为评价手段，以抑瘤率、脾脏指数、cAMP、cGMP、IL-1β、TNF-α浓度作为评价指标，综合验证筛选出的最佳分子量区间段组分抗阴虚毒热型非小细胞肺癌的药效学作用。
结果:①吉祥草配伍余甘子抗Lewis细胞增殖抑制作用的最佳提取方法为95％乙醇渗漉法。②95％乙醇渗漉提取物抗Lewis细胞增殖抑制作用的最佳分子量区间段组分为分子量10～30KD与分子量＜1KD组分。③分子量≤1KD组富集更多总酚酸与总皂苷，其总酚酸含量为192.245mg/g，其总皂苷含量为88.409mg/g，另外分子量10～30KD富集较多的总皂苷。分子量1～5KD富集较多总黄酮，其总黄酮含量为59.899mg/g。综合分析，分子量≤1KD组与分子量10～30KD组富集的总酚酸、总皂苷更可能是抗肿瘤细胞的药效成分。④小鼠阴虚毒热型模型出现体重增长缓慢、瘦小、躁动不安、肛温测量反应体温升高的现象，血清中与阴虚本质相关的生物指标cAMP浓度升高(P＜0.01)、cGMP浓度下降(P＜0.01)，代表肺热证的炎症因子IL-1β、TNF-α浓度升高(P＜0.05)。⑤吉祥草配伍余甘子95％乙醇渗漉提取物的分子量10～30KD与分子量≤1KD组合组分高剂量组能显著增加小鼠阴虚毒热型非小细胞肺癌模型脾脏指数(P＜0.01)，能显著抑制小鼠阴虚毒热型非小细胞肺癌，高剂量组抑瘤率为34.55％(P＜0.01)，中剂量组抑瘤率为11.52％(P＜0.05);高剂量组明显降低血清中与阴虚本质相关的生物指标cAMP的浓度(P＜0.05)、升高cGMP的浓度(P＜0.05)，中剂量组无明显差异;高、中剂量组对代表肺热证的炎症因子IL-1β无明显差异，高剂量组能明显降低代表肺热证的炎症因子TNF-α(P＜0.05)，中剂量组无明显差异。
结论:膜分离技术分离可以富集有效成分;通过膜分离技术分离得到的吉祥草配伍余甘子最佳分子量区间段组合对小鼠阴虚毒热型非小细胞肺癌有抑制肿瘤的作用，高剂量组抑瘤作用较为明显。此外，有不同程度的改善阴虚毒热型非小细胞肺癌小鼠免疫功能的作用及消减小鼠的阴虚毒热证候。其抗阴虚毒热型非小细胞肺癌的作用可能与降低血清中cAMP的浓度、升高血清中cGMP的浓度、降低血清中TNF-α浓度及改善免疫功能的作用有相关性。
方法:①鲜药榨汁、传统水煎、渗漉为提取方法制得吉祥草配伍余甘子的不同提取物，以Lewis细胞体外实验模型作为评价手段，优选药材的最佳提取方法。②通过膜分离技术，将最佳提取方法的提取物分段截留得到不同分子量区间段组分，以Lewis细胞体外实验模型作为评价手段优选最佳的分子量区间段。③建立总酚酸、总黄酮、总皂苷的含量测定方法。测定各个分子量区间段总酚酸、总黄酮、总皂苷含量，分析总酚酸、总黄酮、总皂苷在各分子量区间段的富集情况及其对Lewis细胞增殖抑制作用的相关性。④通过甲状腺素加利血平法结合内毒素滴鼻致热建立与临床证候相吻合的小鼠阴虚毒热型模型并且进行评价，为研究吉祥草配伍余甘子抗阴虚毒热型非小细胞肺癌药效学验证提供稳定可靠的模型。⑤以小鼠阴虚毒热型非小细胞肺癌模型为评价手段，以抑瘤率、脾脏指数、cAMP、cGMP、IL-1β、TNF-α浓度作为评价指标，综合验证筛选出的最佳分子量区间段组分抗阴虚毒热型非小细胞肺癌的药效学作用。
结果:①吉祥草配伍余甘子抗Lewis细胞增殖抑制作用的最佳提取方法为95％乙醇渗漉法。②95％乙醇渗漉提取物抗Lewis细胞增殖抑制作用的最佳分子量区间段组分为分子量10～30KD与分子量＜1KD组分。③分子量≤1KD组富集更多总酚酸与总皂苷，其总酚酸含量为192.245mg/g，其总皂苷含量为88.409mg/g，另外分子量10～30KD富集较多的总皂苷。分子量1～5KD富集较多总黄酮，其总黄酮含量为59.899mg/g。综合分析，分子量≤1KD组与分子量10～30KD组富集的总酚酸、总皂苷更可能是抗肿瘤细胞的药效成分。④小鼠阴虚毒热型模型出现体重增长缓慢、瘦小、躁动不安、肛温测量反应体温升高的现象，血清中与阴虚本质相关的生物指标cAMP浓度升高(P＜0.01)、cGMP浓度下降(P＜0.01)，代表肺热证的炎症因子IL-1β、TNF-α浓度升高(P＜0.05)。⑤吉祥草配伍余甘子95％乙醇渗漉提取物的分子量10～30KD与分子量≤1KD组合组分高剂量组能显著增加小鼠阴虚毒热型非小细胞肺癌模型脾脏指数(P＜0.01)，能显著抑制小鼠阴虚毒热型非小细胞肺癌，高剂量组抑瘤率为34.55％(P＜0.01)，中剂量组抑瘤率为11.52％(P＜0.05);高剂量组明显降低血清中与阴虚本质相关的生物指标cAMP的浓度(P＜0.05)、升高cGMP的浓度(P＜0.05)，中剂量组无明显差异;高、中剂量组对代表肺热证的炎症因子IL-1β无明显差异，高剂量组能明显降低代表肺热证的炎症因子TNF-α(P＜0.05)，中剂量组无明显差异。
结论:膜分离技术分离可以富集有效成分;通过膜分离技术分离得到的吉祥草配伍余甘子最佳分子量区间段组合对小鼠阴虚毒热型非小细胞肺癌有抑制肿瘤的作用，高剂量组抑瘤作用较为明显。此外，有不同程度的改善阴虚毒热型非小细胞肺癌小鼠免疫功能的作用及消减小鼠的阴虚毒热证候。其抗阴虚毒热型非小细胞肺癌的作用可能与降低血清中cAMP的浓度、升高血清中cGMP的浓度、降低血清中TNF-α浓度及改善免疫功能的作用有相关性。