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乳房炎是一种由乳房内病原菌感染引起的乳房炎症性疾病,包括临床乳房炎和亚临床乳房炎(或称隐性乳房炎),是制约我国乃至全世界奶牛和奶山羊养殖业发展的重要疾病之一。患病个体泌乳量以及泌乳质量严重下降,甚至会对幼畜的健康造成很大的影响,经济损失每年都高达数亿元。作为机体屏障系统的重要组成部分,乳腺内具有丰富数量的γδT细胞。γδT细胞作为固有免疫系统的重要组成部分,活化后主要产生两种类型的效应细胞因子--IFN-γ和IL-17,均密切参与机体的抗感染免疫。但是γδT细胞具体以何种方式在乳腺抗病原菌感染免疫中发挥作用,乳腺γδT细胞活化的调节机制等,尚无研究报道。本研究采集患有乳房炎的奶山羊乳汁,使用定量PCR的方法对IL-17~+γδT细胞趋化诱导和中性粒细胞迁移相关的细胞因子进行检测;使用以金黄色葡萄球菌和IL-17刺激体外培养的奶山羊乳腺上皮细胞,使用定量PCR的方法对γδT细胞趋化和中性粒细胞迁移相关的细胞因子进行定量检测;以S.aureus乳腺炎小鼠为模型,分别采用流式细胞术和real-time PCR技术对γδT细胞在乳腺抗S.aureus感染中的角色进行研究,探讨γδT细胞参与乳腺抗病原菌感染免疫的方式。获得研究结果如下:1. 患乳房炎奶山羊乳汁中IL-17、IL-23、IL-1β与TGF-β的m RNA水平都表现出显著升高(P<0.05);γδT细胞趋化因子(CCL2)及其受体(CCR2)的m RNA相对表达量也显著上升(P<0.01)。2. S.aureus刺激后,乳腺上皮细胞的CCL2)的表达水平在m RNA和蛋白质分子水平均显著升高(P<0.001);S.aureus与IL-17可以更显著的促进乳腺上皮细胞IL-8、CXCL6与CCL4在m RNA水平高表达(P<0.01)。3. 乳腺炎小鼠乳腺中IL-17~+γδT细胞占淋巴细胞数量的比例显著升高(P<0.001);Il1b、Il6和Il17 m RNA水平显著增加(P<0.05);Il23和Tgfb m RNA水平变化差异不显著(P>0.05)。4. 乳腺炎小鼠乳腺中γδT细胞与中性粒细胞趋化因子检测结果显示:Ccr2和Ccl2m RNA水平显著增加(P<0.05);中性粒细胞趋化因子Ccl4和Cxcl6 m RNA水平显著增加(P<0.05);与中性粒细胞活化相关的Cxcr4 m RNA水平显著增加(P<0.05)。5. 乳腺炎小鼠乳腺中与M2型巨噬细胞相关的Ym-1、Cd206,Arginase-1、Fizz-1与IL10分子的m RNA表达量皆显著上升(P<0.05)。6. 患乳房炎奶山羊乳汁中与M2型巨噬细胞相关的细胞因子Cd206、Arginase-1与IL10的m RNA表达量皆显著上升(P<0.05)。结论:1.患乳房炎奶山羊的乳腺具有适宜IL-17~+γδT细胞活化的局部细胞因子微环境。2.S.aureus和IL-17可以在体外刺激乳腺上皮细胞分泌γδT细胞和中性粒细胞趋化因子。3.天然免疫应答阶段,介导乳腺炎的IL-17来自乳腺中的IL-17~+γδT细胞。4.乳腺中IL-17~+γδT细胞的百分比显著上升,而脾脏中γδT细胞百分比无显著变化。5.M2型巨噬细胞分泌IL-10负调控免疫应答,避免免疫病理损伤。