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背景：肾移植术后患者需要服用免疫抑制剂来预防排斥反应的发生，移植物的短期存活率较前有了很大的提高，但遗憾的是排斥反应仍是移植器官长期存活的障碍。移植器官存活率虽然改善了，移植受者发生感染，癌症的机会却增加了。如何监测移植受者的免疫状态，平衡免疫抑制不足和免疫抑制过度，合理使用免疫抑制药物，是现代移植学所面临的重要课题。现在免疫抑制剂大多数是抑制T细胞的活化及其效应功能。CD4~+T淋巴细胞在移植术后的免疫反应中起重要作用，免疫细胞的能量来源于细胞内的ATP，测量CD4~+T淋巴细胞的ATP值可以反映机体的免疫功能。通过FDA认证的Cylex-ImmuknowTM技术，广泛用于临床。它通过测量CD4~+T淋巴细胞经植物凝血素（PHA）刺激后所释放的三磷酸腺苷（ATP）含量变化，以反映移植者免疫功能状态。本课题即利用这种技术研究健康者和肾移植受体细胞免疫状态的变化结果。目的：1.探讨利用Cylex-ImmuknowTM技术监测肾移植受者术后免疫状态在临床应用的可行性。2.利用Cylex-ImmuknowTM技术监测肾移植受体CD4~+T淋巴细胞经植物凝血素（PHA）刺激后所释放的三磷酸腺苷（ATP）含量变化趋势，了解肾移植手术前后受者免疫功能状态的变化。3.利用Cylex-ImmuknowTM技术监测肾移植受体在发生急性排斥，肺部感染及有效治疗后的ATP变化，探讨这种方法在预示排斥反应，肺部感染中的作用。4.利用Cylex-ImmuknowTM技术监测经Basiliximab诱导治疗的肾移植受体术后细胞免疫功能变化，探讨Basiliximab对细胞免疫功能的影响。5.通过测得的ATP值与CSA/FK506血药浓度的相关性分析，探讨Immuknow技术在个体化治疗中全面评估细胞免疫功能状态的作用。方法：选取2010年10月至2012年1月在济南军区总医院接受肾移植的患者80例，其中男性65例，女性15例，年龄(33.71±9.37)岁(18-62岁)。肾移植术后采用三联免疫抑制方案：MMF+CNI（FK506/CSA）+激素药物。一部分采用巴利昔单抗（Basiliximab）行免疫诱导治疗。另外检测健康成年人25例，其中男性14名，女性11名，年龄为18-71岁，平均为38.5±14.5岁。对健康人和肾移植受者（术前，术后7d、15d、24d、30d、排斥和肺部感染时及有效治疗后）的血液标本利用Cylex-ImmuknowTM技术行CD4~+T淋巴细胞内ATP的测定，另外记录ATP值相对应的（FK506/CSA）血药浓度。Cylex-ImmuknowTM的实验过程包括：1.细胞的刺激2.CD4~+细胞的选择和释放3. CD4~+细胞ATP的测量。对测得的数据行统计学分析。结果：1.80例肾移植患者术前CD4~+T淋巴细胞的ATP水平为(385.54±121.76)ng/ml，明显低于对照组(441.12±88.76) ng/ml（健康人，n=25）,经独立样本的t检验，两组差异有统计学意义（P=0.037）。2.肾移植术后术后7d、15d、24d、30d的CD4~+T淋巴细胞的ATP水平分别为(180.68±50.92)ng/ml,(215.95±131.26)ng/ml,(252.65±84.42)ng/ml,(337.13±60.52)ng/ml。术后7d降至最低水平,20例采用抗体诱导者明显降低，同期内与未用抗体诱导者比较有统计学意义(P<0.05)。术后15d开始回升，抗体诱导组回升较慢，与同期内未用抗体诱导者比较有统计学意义(P<0.05)。但术后30d仍低于术前水平(P<0.05)。3.13例肾移植受者发生急性排斥反应，其术前，排斥反应发生时，有效治疗后14d的ATP水平分别为：(338.36±103.03)ng/ml,(507.02±125.37)ng/ml,(372.53±92.73)ng/ml。急性排斥反应发生时ATP水平高于术前，经LSD-t检验，P<0.05,急性排斥时的ATP与术前差异有统计学意义。排斥反应有效治疗后14d后，ATP水平下降，14d时低于急性排斥反应发生时，经LSD-t检验，P<0.05,其差异有统计学意义。4.20例肾移植受者肺部感染确诊时CD4~+T淋巴细胞的ATP水平下降(138.74±55.57)ng/ml，要低于术前(383.04±84.58)ng/ml,经LSD-t检验，P<0.05,其差异有统计学意义。经有效治疗后14d，ATP水平上升(238.16±31.40)ng/ml，高于肺部感染确诊时，经LSD-t检验，P<0.05,其差异有统计学意义。5.肾移植术后15d,24d,30d肾移植受者CSA或FK506浓度与ATP浓度之间用Pearson直线相关分析，双侧结果P>0.05,ATP值与CSA/FK506血药浓度无相关性。结论：1.利用Cylex-ImmuknowTM技术监测肾移植患者术后的细胞免疫功能状态有可行性。2. Immuknow法所测得的CD4~+淋巴细胞内的ATP值，在急性排斥反应时上升明显，在受者肺部感染时下降明显，对预测排斥反应和肺部感染可能有一定的作用。3.巴利昔单抗（Basiliximab,simulect,舒莱）,可以有效的降低肾移植受者术后早期的细胞免疫功能。4.目前血药浓度的调整可以平衡免疫过度和免疫不足，但本研究表明CSA/FK506的血药浓度和ATP浓度之间无直接相关性，进一步表明在个体化治疗中全面评估细胞的免疫功能状态的重要性。5.利用Cylex-ImmuknowTM技术监测肾移植受者的细胞免疫功能状态具有快速、灵敏，针对性强等特点，有利于调整免疫抑制剂用量，优化治疗方案。